lem及i-lem基因突变型家蚕体表色素组分差异研究

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1、分类弓０９６６单化代巧：１０３６４密级；与：１２７２０化０学么化义等学位论文’ｆｅｗ及－ｚｆｃｗ基因突变型家蚕体表色素姐分差异硏究Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｐｉｍｅｎｔｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｌｅｍａｎｄｇｐ－ｚｋｗｓｉｌｋｗｏｒｍｍｕｔａｎｔｓ研究生：黄雜指导教师；孟艳教授合作指导教师；申请学位口类级别：理学硕壬专业名称；牛物化学与分子生物学研究方向：昆虫生化与分子生物学所在学院；生命科学学院

2、扎答辩委员会主席；線寺２０１５年６月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个Ａ在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研＾＾＾示注和致谢的地方外究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间；＾（５年＾月＆日关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件

3、和磁盘，允许论文被查阅和借阅，、缩可Ｗ采用影印印或扫描等复制手段保存、发表、播学的全部汇编学位论文。同意安徽农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上传位论文或。部分内容研巧生签名时间：年月曰（麥２ｘ）９：ｔ签名：时；年曰导师间）、月＞ｔＳ］摘要柠檬蚕（lemon，lem）是家蚕的一种黄体色突变体，其体色呈现黄色是由于墨蝶呤（sepiapterin，SP）在幼虫体表大量累积而造成。前期研究表明lem体内墨蝶呤还原酶基因BmSpr的碳端发生了5个氨基酸的缺失，是导致SP过量累积的遗传原因。与lem突变蚕相比，黄体色抑制(inhib

4、itoroflem,i-lem)突变体的幼虫体色呈现从淡黄到白色不同程度的浅色，其体表的SP含量有所减少。至今，i-lem突变基因的分子实质尚未被克隆鉴定，其抑制lem突变基因(BmSpr)表达的分子调控机理尚不清楚。因此，分析和比较lem与i-lem突变体幼虫体表的色素沉积模式（色素的种类和含量）对于理解i-lem与lem的互相作用机制具有重要的研究意义。本研究首先利用扫描电子显微镜对不同基因型的家蚕幼虫表皮进行组织形态学观察，着重比较lem和i-lem突变蚕之间的异同。结果表明l82普斑（i-lem/+，lem/lem）表皮结构中含有明显的

5、颗粒状物质，而ah09（lem/lem）、l82素斑（i-lem/i-lem，lem/lem）中则并未出现该种颗粒状物质。接着采用高效液相色谱（highperformanceliquidchromatography，HPLC）紫外吸收法对五种蚕体表的SP含量进行了定量比较分析，发现ah09的含量最高，其次是l82普斑，而l82素斑、l83（i-lem/i-lem，+/+）及p50(+/+)中几乎没有检测到SP。然后利用HPLC对上述五种蚕的表皮成分进行荧光检测实验，结果发现ah09和l82普斑蚕在t=5.7min时出现特有的峰信号，而l82素斑

6、、l83等品系则并没有出现该峰信号。最后利用傅立叶红外光谱法进行官能团分析，发现l82素斑和l83中含有碳磷键，明显区别于其他三种蚕。综上，本研究所获得的结果为今后鉴定i-lem对lem的表达调控机制奠定了一定的实验基础。关键词：lem，i-lem，色素，墨蝶呤，高效液相色谱，红外光谱IAbstractThelemsilkworm(lemon,lem)isakindofyellowbodycolormutantbecausealargeamountofsepiapterin(SP)hasaccumulatedinthelarvalintegum

7、ent.ThefundamentalreasonofalargenumberofaccumulationoftheSP,isadeletionofthe5aminoacidsinmutantSPRcarbonterminal.ThelackofSPRisduetothemutationofSPRgene(BmSpr)ofthelemsilkworm,andthenthiscausesgeneticdefects.Whilethei-lemsilkwormcontainsi-lemgene,andthisinhibitstheexpression

8、oflemgene.Therefore,comparedwiththemutantoflemsilkworm,theSPcontentonthelar