l-精氨酸对猪孤雌激活胚胎及体细胞克隆胚胎发育的影响

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1、８４８１分类号：Ｓ１．单位代码：０３６４－密级：公开学号：ｎ巧犯会歡策妓义ｆ学位论文以精氨酸对猪孤雌激活胚胎发体细胞克隆赃胎发育的影晌Ｅｆｆｅｃ－ｅｖｅｔｓｏｆＬａｒｇｉｎｉｎｅｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｎｄｌｏｐｍｅｎｔｏｆｐｏｒｃｉｎｅａｒｔｈｅ打ｏｅｎｅ村ｃａｃｔｉｖａｆ：ｅｄｏｒｓｏｍａｔｉｃｃｌｏｎｅｄｐｇｅｍｂｒｙｏｓ研究生：刘通指导敬师：弓长运海教授合作指导教师：章孝荣教授申请学位口类级

2、别：农学硕±专业名称：动物遗传育种与繁殖＇研究方向；动物胚胎工程所在学院；动物科巧学院答辩委员会主席：＾４＾二零一五年六月AnhuiAgriculturalUniversityMasterDegreeThesisEffectsofL-argininesupplementationondevelopmentofporcineparthenogeneticactivatedorsomaticclonedembryosPostgraduatecandidate:LiuTongA

3、cademicsupervisor:Prof.ZhangYunhaiCo-supervisor:Prof.ZhangXiaorongCollegeofAnimalScienceandTechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei,230036Anhui,P.R.ChinaJune,2015本项研究受下列基金资助1.国家自然科学基金项目（31272442）2.转基因生物新品种培育重大科技专项（2014ZX08006-01B）3.安徽省现代生猪产业技术体系SUPPORTEDB

4、Y1.NationalNaturalScienceFoundationofChina(31272442)2.GeneticallyModifiedOrganismsTechnologyMajorProject.(2014ZX08006-01B)3.AnhuiProvincialModernSwineIndustryTechnologyResearchSystem独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中持别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他

5、人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。一女１。化见时间４研究生签名：；主年月／日—／关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留，：、使用学位论文的规定即学校有权、保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的

6、全部或部分内容。〇研巧生签名：文时间：又／＾年月曰＿恤＾｜（ｆ／？＾导师签名：时间；ｙ年月／曰摘要猪体细胞克隆技术在畜牧业遗传育种和生物医学疾病模型中起着重要的作用。而猪体细胞克隆还存在较多问题，如克隆效率较低、胎盘发育异常和克隆胎儿存在生理缺陷等。因此要实现体细胞克隆技术走出实验室，服务于动物生产以及在医学领域广泛应用，必须改进克隆胚胎的生产体系，充分发挥其发育潜力。L-精氨酸(L-Arginine,L-Arg)作为条件必需氨基酸，在日粮中补饲可提高自然受孕妊娠母猪生产性能，在体外培养液中添加

7、也有利于猪体外受精胚胎发育。然而，关于L-Arg对猪体细胞克隆胚发育是否也有积极影响报道很少。本文探讨了在培养基中添加L-Arg对猪孤雌激活胚胎(PAEs)、体细胞克隆胚胎(NTEs)体外发育的影响；研究了在日粮中添加L-Arg对移入NTEs的代孕母猪妊娠率、产仔率的影响，具体试验及结果如下：试验一研究了在卵母细胞成熟液中添加L-Arg对猪卵母细胞体外成熟及早期PAEs发育的影响。试验组为在卵母细胞化学限定性成熟培养基中补充0.12mM、0.36mM、0.72mM、1.08mM的L-Arg，对照组则采用相同培养基

8、但不补充L-Arg。结果是相对于对照组，添加L-Arg的各试验组卵母细胞成熟率，及其来源的PAEs卵裂率、囊胚率和囊胚总细胞数均有略微改善，但差异不显著(P>0.05)。结果表明，仅在卵母细胞成熟阶段添加L-Arg，不能有效提高卵母细胞成熟及着床前胚胎发育质量。试验二探讨了在胚胎培养液中添加L-Arg对PAEs发育的影响。在胚胎培养基中补充0.12mM、0.36mM、0.