热应激对牛体细胞克隆胚胎早期发育的影响

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1、Y分类号：Q13Z：＆±翘鲤：§UDCz§Z§密级：叁珏学校代码：10712研究生学号：020040994西北农林前捉大学2007届攻读硕士学位研究生学位(毕业)论文热应激对牛体细胞克隆胚胎早期发育的影响学科专业研究方向研究生指导教师完成时间蕉直生物堂随雯L动物厘脸王摆．送弛瑟通熬援星QQZ生曼旦中国陕西杨凌热应激对牛体细胞克隆胚胎早期发育的影响摘要选取西安本地屠宰场牛卵母细胞，通过对成熟前卵母细胞进行不同温度热应激处理(对照组38．5℃，组239．5℃，组340．5℃，组4，41．5℃，组542．512)，比较重构胚的卵裂率，囊胚率，并对不同供体细胞形成的克隆胚囊胚细

2、胞数目进行比较，研究短时间(30rnin)热应激对核移植后重构胚发育的影响。对未采取热应激措施卵母细胞形成的克隆胚分别在单细胞阶段和桑椹胚阶段：(1)以温度高低为标准(分组同上试验)进行30rain热应激处理，统计囊胚发育率；(2)以高于对照组温度2℃的温度热处理30min，1h，2h，统计囊胚发育率。研究热应激强度对胚胎的损伤影响。结果表明：1．卵母细胞41．5℃下30min的热应激，与对照组相比，卵裂率以及囊胚率都有显著提高(P<0．05)。但是42．5℃组，虽然卵裂率有所提高，囊胚率与对照组相比却显著降低(p<0．05)。．2用三种不同供体细胞分别进行核移植。发现

3、热应激卵母细胞形成的克隆胚与未热应激的卵母细胞形成的克隆胚相比，在囊胚细胞数上无显著差异(胗O．05)．说明热应激不会影响胚胎的质量，并且这一结果与供体细胞的种类无关。3．对单细胞克隆胚进行30min热应激发现，随着应激温度的升高，克隆胚胎的卵裂率与对照组相比没有明显负效应(P>o．05)，而囊胚发育率确逐渐降低，相比对照组，从41．5℃组开始有显著负效应(P．(0．05)。4．对桑椹克隆胚进行30min热应激发现，随着应激温度升高，囊胚发育率呈下降趋势，42．5℃组与对照组相比有明显负效应∽O．05)。5．对单细胞克隆胚进行40．5℃热应激发现，随着热应激时间的延长，

4、胚胎发育呈下降趋势。lh以上40．5℃的热应激会显著影响胚胎的发育能力(P

5、hounghdiffertemperaturesofhearstressonoocytewlfichunmatured(ControlGroup，38．5"C；Group2，39．5"C；Group3，40．5℃；Group4，41．5"12；Group542．5℃)，Comparingthecleavagerateandbl嬲toeystrateofreconstructembryo，comparingthetotalnumberofblastocystcellwhichcalnefromdifferentdonorcells，studyontheeffectofcl

6、onedembryonicdevelopmentcausedbyshorttime(30min)heatstress。Doresearchesonthestagesofonecellemlryoandmomlaembryocamefromoocyteswhichhavenotundertheheatshock：(1)Usedifferenttemperaturesasstandard(Groupingasbefore)heatstressin30min，computetheblastocystrate；(2)Usethetemperaturewhichis2℃highe

7、rthencontrolgroupheatshockin30min，lh，2h，compmetheblastocystrate。Studyonthedamageinfluceonembryocausedbydifferentintensityofhentstress．Inconclusion：130rainHeatshockonoocytein41．5℃，improvedthecleavagerateandblastocystrateofclonedembryosignificantlycomparingthecontrolgroup(P