dsrna和重组tmv介导的针对玉米黏虫chitinase基因的rna干扰研究

《dsrna和重组tmv介导的针对玉米黏虫chitinase基因的rna干扰研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学校代码：１０１２６学号：３１３０８１０５分类号：编号：ＩＮＮＥＲＭＯＮＧＯＬＩＡＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ爾士攀像论龛ＭＡｉＴＥＥＤｌｉＳＥＲＴＡＴＩＯＷｄｓＲＮＡ和重组ＴＭＶ介导的针对玉米點虫Ｃｈｉｔｉｎａｓｅ基因的ＲＮＡ干扰研究学院：生命料学学院专业：生物工程研究方向：农牧业基因工程姓名：曹布道指导教师：哈达教授２０１５年４月２２日内蒙古大学硕士学位论文学校代码：１０１２６号：３１３０８１０５学分类号：编号：论文题目ｄｓＲＮＡ和重组ＴＭＶ介导的针

2、对玉米點虫Ｃｈｉｔｉｎａｓｅ基因旳ＲＮＡ干扰研究学院：生命科学学院专业：生物工程研究方向：农牧业基因工程姓名：曹布道指导教师：哈达教授２０１５年４月２２日Ｉ内蒙古大学硕士学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除本文已，也不包含为获彳其他经注明引用的内容外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果胃＃？教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。８＾学位论文作者签名：省

3、知指导教师签名：ｌＯ义－２＾水６？．６日期：日期：在学期间研究成果使用承诺书本学位论文作者完全了解学校有关保留，：内蒙古大学有权将学位论文的全、使用学位论文的规定即、部内容或部分保留并向国家有关机构部门送交学位论文的复印件和磁盘，允许编入有关数据库进行检索，也可以采用影印，、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文。为保护学院和导师的知识产权作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研宄内容或研宄成果，须征得内蒙古大学就读期间导师的同意；若用于发表论文，版权单位必须署名为内蒙古大学方可投稿或公开发表。：

4、学位论文傾銘：省”後指导酬鮮＇‘‘对．名日期：日期：内蒙古大学硕士学位论文ｄｓＲＮＡ和重组ＴＭＶ介导的针对玉米粘虫Ｃｈｉｔｉｎａｓｅ基因的ＲＮＡ干扰研究摘要ＲＮＡｉＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ，ＲＮＡ干扰是序列特异的基因沉默技术。ＲＮＡｉ在（）植物抗病领域得到了广泛的应用，２００７年美国Ｍｏｎｓａｎｔｏ公司及中国科学院研宄人员利用ＲＮＡｉ技术分别获得了抗虫转基因玉米和棉花，为农业害虫的防控提供了新的思路和途径。玉米粘虫是属于麟翅目夜蛾科的非常重要的农药害虫。近几年，玉米粘虫在我国华北地区爆发成灾，迫切需要探索有效的

5、控制途径。ｃｈｉｔｉｎａｓｅ基本实验中挑选了对粘虫生长发育至关重要的因做为候选基因，？？设计合成和检测了抑制＾＾／？／ｚ？？？ｙｅ基因的干扰ＲＮＡ序列。为了达到ＲＮＡｉ效果，一ＲＮＡ工饲料混我们设计了两个实验。第，体外合成针对ＩＥ基因的ｄｓ，并与人匀，词喂玉米粘虫。第二，为了检测植物体内表达的ｄｓＲＮＡ所介导的ＲＮＡｉ效应，本研究将干扰片段克隆到植物病毒载ＴＭＶ（ＰＪＬ３６），并将重组载体侵染了本氏烟草。ＴＭＶ病毒的复制过程会产生相应插入序列对应的ｄｓＲＮＡ，将其词喂。给玉米粘虫，以期在玉米粘虫体内产生针对ＩＥ基因的ＲＮＡ干扰效应随后

6、，本研究通过测定以下指标来检测了上述两种方法介导的ＲＮＡｉ效应。焚光定量ＰＣＲ结果表明，ｃｈｉｔｉｎａｓｅ１和ｃｈｉｔｉｎａｓｅ２基因的表达量降低，同时也利用序列特异的探针检测到了对应的ｓｉＲＮＡ，说明通过体外合成的ｄｓＲＮＡ和植物体病毒复制所产生的干扰ＲＮＡ被玉米粘虫体吸收后均引起了ＲＮＡｉ效应。另外，ｃｈｉｔｉｎａｓｅ１＞ｃｈｉｔｉｎａｓｅ！基因的干扰导致了受试玉米粘虫的体重减少及死亡率增加。本实验为利用ＲＮＡｉ来防治玉米粘虫提供了实验数据，后续实验中我们将上述干ｎＲＮＡ一ＲＮＡ扰序列以ｈａｉｒｐｉｄｓ形式转基因表达ｉ技术培育抗玉

7、，进步探讨通过Ｉ内蒙古大学硕士学位论文米點虫转基因植物的技术路线和方法。关键字：ＲＮＡ干扰，玉米黏虫，ｃｈｉｔｉｎａｓｅ基因，ＴＭＶ病毒，ｄｓＲＮＡＩＩ内蒙古大学硕士学位论文ＲＮＡｉＥＦＦＥＣＴＳＴＯＷＡＲＤＣＨＩＴＩＮＡＳＥＧＥＮＥＳＩＮＭＹＴＨＭＩＮＡＳＥＰＡＲＡＴＡＢＹ－ＯＲＡＬＤＥＬＩＶＥＲＹＯＦＤＯＵＢＬＥＳＴＲＡＮＤＥＤＲＮＡｓＡＮＤＲＥＣＯＭＢＩＮＡＮＴＴＯＢＡＣＣＯＭＯＳＡＩＣＶＩＲＵＳＡＢＳＴＲＡＣＴＲＮＡｉＲＮＡｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｉｓ