d-柠檬烯对酒精性脑损伤大鼠nf-κb、iκb及tnf-α、il-10表达的影响

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1、分类号：R151.2密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文D-柠檬烯对酒精性脑损伤大鼠NF-κB、IκB及TNF-α、IL-10表达的影响吕海涛指导教师梁惠教授学科专业名称营养与食品卫生学论文答辩日期2015年11月27日中文摘要目的：观察D-柠檬烯对酒精性脑损伤大鼠脑组织核因子-κB(NF-κB)、核因子κB抑制蛋白(IκB)表达及与肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-10(IL-10)水平的影响。方法：60只雄性SPF级Wistar大鼠，体重为180～200g。适应性喂养7天后，按随机数字表法，将其分为6组(n=10)。A组：空白对照组，每日予以生理盐水灌胃前

2、2周为8ml/(kg·d)，后4周为12ml/(kg·d)。B组：酒精模型组，每日予以50％(V/V)乙醇灌胃，前2周为8ml/(kg·d)，后4周为12ml/(kg·d)。C、D、E三组分别给予不同浓度的D-柠檬烯灌胃，剂量分别为100、200、400mg/(kg·d)，同时每日给予50%(V/V)酒精，剂量同模型组。F组为单独D-柠檬烯高剂量组，每日给予D-柠檬烯的量为400mg/(kg·d)。末次给药后，大鼠禁食不禁水12h，10%水合氯醛麻醉，留取脑组织。左侧脑组织用HE染色法观察其病理学改变；免疫组织化学法检测脑组织中NF-κB、IκB表达情况，计算其阳性细胞数；右侧脑组织

3、用酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑匀浆中TNF-α、IL-10的浓度。结果：（1）组织病理学观察：经过HE染色后，观察发现酒精组海马区神经元数量减少，分布不均匀，细胞核明显固缩变形，难以分辨。空白对照组及单独D-柠檬烯高剂量组海马区神经元排列层次较清，细胞结构完整（核圆而大、核膜清楚、HE染色均匀），个别神经元出现异形，表现为核固缩、胞体比正常缩小、形状不规则、胞质染色为深红色。柠檬烯各剂量组海马区有数量不等的异形神经元，与酒精模型组相比，异形神经元数量明显减少。（2）NF-κB、IκB蛋白在大鼠脑组织中的阳性细胞数：酒精模型组与空白对照组相比NF-κB阳性细胞数增多，IκB阳性细

4、胞数减少(P<0.05)；给予不同剂量的柠檬烯后各组大鼠脑组织中的NF-κB阳性细胞数随着柠檬烯剂量的增加逐渐减少、IκB阳性细胞数逐渐增多，同模型组对比(P<0.05)；空白对照组与单纯D-柠檬烯药物组之间差异无统计学意义。（3）大鼠脑组织匀浆中TNF-α的表达：模型组脑匀浆中TNF-α的表达明显高于对照组(P<0.05)；柠檬烯低、中、高剂量组大鼠脑匀浆中TNF-α表达降低，与模型组相比(P<0.05)；单纯D-柠檬药物组与空白对照组相比差异无统计学意义。（4）大鼠脑组织匀浆中IL-10的表达：酒精模型组中IL-10的表达高于空白对照组(P<0.05)；柠檬烯中、高剂量组大鼠脑匀

5、浆IL-10的表达明显高于酒精模型组(P<0.05)；空白对照组与单纯D-柠檬药物组相比差异无统计学意义。结论：D-柠檬烯可以减轻过量酒精摄入引起的脑组织损伤，作用机制可能与抑制NF-κB的表达、上调IκB的表达以及调节TNF-α、IL-10的水平有关。硕士研究生：吕海涛（营养与食品卫生学）指导老师：梁惠教授关键词：D-柠檬烯；酒精性脑损伤；NF-κB;TNF-α;IL-10AbstractObjective:ToobserveinfluencesofD-limoneneonbraintissuenuclearfactor-κB(NF-κB)andnuclearfactorκBpro

6、filin(IκB)expressioninratswithalcoholicbraindamage,tumornecrosisfactor(TNF-α),andinterleukin-10(IL-10)level.Methods:Selected60maleWistarratsofgradeSPFwiththeweightof180-200g,afterfeeding7daysadaptively,dividedtheminto6groups(n=10)inlinewiththerandomnumbertable.TheAgroup:blackcontrolgroup,afterg

7、ivingnormalsalinetodogavageeveryday,thetoptwoweekswere8ml/(kg•d),andlaterfourweekswere12ml(kg•d).TheBgroup:alcoholmodelgroup,Aftergiving50%(V/V)ethylalcoholtodogavageeveryday,thetoptwoweekswere8ml/(kg•d),andthelaterfourweekswere12