bcg免疫小鼠血清特异性抗体与脾脏免疫相关基因表达的相关性研究

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1、分类号:Q5单位代码：10193密级：公开学号：2012086硕士学位论文BCG免疫小鼠血清特异性抗体与脾脏免疫相关基因表达的相关性研究CorrelationsbetweenBCGVaccinationonSpecificAntibodiesinSerumandtheExpressionofImmunity-relatedGenesinSpleenfromMice作者姓名：武月章学位类别：理学硕士专业名称：微生物学研究方向：分子病原微生物指导教师：张林波教授所在学院：生命科学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈

2、交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成

3、的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日

4、期：年月日摘要目的：接种卡介苗（BacillusCalmettee-Guerin，BCG）是人类预防结核病(tuberculosis，TB)的主要手段之一。BCG是世界上唯一一种得到许可的结核病疫苗，然而近些年，它的多种弊端正逐渐显现。因此，人们需要深入了解BCG诱导机体产生免疫效应的机制，这样才能在此基础上研发更为有效的新型结核疫苗。本研究在以BCG免疫小鼠后，观察不同时间点的血清特异性抗体效价、脾脏免疫相关细胞因子表达以及脾脏免疫相关受体分布情况，分析其变化规律及相关性，为探究BCG的免疫机制及研发新型结核疫苗奠定

5、基础。方法：利用BCG免疫小鼠，采集不同时间点的外周血和脾脏样本。应用间接ELISA方法检测血清中特异性抗体效价，实时荧光定量PCR方法检测脾脏中免疫相关细胞因子IL-2、IL-10、IL-4、IL-12、IFN-γ的表达水平，直接免疫荧光组化方法检测脾脏中免疫相关受体TLR2、TLR9的表达分布情况。结果：BCG免疫小鼠后，成功检测到血清中特异性抗体水平随着时间延续呈现一种缓慢上升-明显上升-缓慢上升-明显上升的趋势，而总体呈上升趋势，证实BCG可以诱导机体产生体液免疫。成功检测到脾脏中IL-2、IL-10、IL-4

6、、IL-12、IFN-γ的表达量发生不同程度的变化，IL-2，INF-γ两种Th1型细胞因子的表达水平在接种后期显著升高，而Th1型细胞因子IL-4的表达水平却发生明显下降。脾脏中的TLR2受体在BCG免疫小鼠的前期阶段表达显著上升，在免疫的后期则下降为普通表达水平。TLR9受体则在BCG免疫小鼠的中期阶段表达显著上升，而在免疫的后期会下降为普通表达水平。结论：在BCG诱导机体产生免疫效应的过程中，机体内的血清特异性抗体、免疫相关细胞因子和免疫相关受体之间存在着相互联系。在免疫的后期，机体中Th1型细胞因子和体液免疫效

7、应呈正相关，而一些Th2型细胞因子则与体液免疫效应呈负相关性。关键词：卡介苗免疫；特异性抗体；免疫相关细胞因子；免疫相关受体；相关性IAbstractObjective:Thetuberculosis(TB)pandemiccontinuestorampagedespitewidespreaduseoftheBCG(BacillusCalmette–Gue´rin)vaccine.BCGistheonlylicensedTBvaccine.However,anumberofepidemiologicalstudiesa

8、ndcontrolledclinicaltrialshaveshownthattheBCGvaccinehasseverallimitations.AsthedevelopmentofnewvaccinesmoreeffectiveandsafethantheBCGvaccineisconsideredapriority,peop