雷帕霉素对树突细胞免疫表型影响的初步研究

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1、学术学位硕±学位论文单位代码：１０６７８分类号；Ｒ３Ｗ４．学号；２０１２３４０密级；尾略ｉ｜种太常硕击学位论文戀雷帕霉素对树突细胞免疫表型影响的初步研究院炼）、所昆明医科大学第二临床医学院硏究生姓名赵越学科、专业外科学（普通外科）学位类型学术学位指导教师张捷教授二〇—五年五月尾略ＩＩ种沪、常硕±学位论文雷帕霉素对树突细胞免疫表型影响的初步研究研巧生姓名赵越学科、专业外科学（普通外科）申请学位类型学术学位指导教师张捷教授

2、完成日期二０—五年五月見略ｓ种天掌研究生学位论文研究撰写声明本人郑重声明：本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位课题研究所取得的研究成果。论文中除特别加Ｗ标注和致谢的地方外，不包含他人或其他机构己瓷发表或撰写过的研巧成果。对本研究和论文做过贡献的同道我均在论文中作了明确的说明并表明谢意。该学位论文资料若有不实之处，本人愿承担一切相关责任。论文作者（签名）：■年ｉ月／又曰尾礎Ｓ种常研巧生学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留、使用学位论文的

3、规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阔和借阅。学校可公布论文的全部或部分内容（确属保密巧容己注明，并在解密后遵守此规定、）；学校可采用影印缩印或其他手段保存本学位论文。学位论文作者（签名）：４據指导教师（签名）年ｒ月１／日年月曰＂本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盎版）电子＂杂志社进行电子和网络出版，并编入Ｃ服Ｉ系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益

4、。（学位论文作者（签名）：心絶指导教师签名）：之妨＾年ｒ月《日年月日／指导小组成员：付必莽博±副主任医师（昆明医科大学第二临床学院）李春满博±主治医师（昆明医科大学第二临床学院）唐波博±主治医师（昆明医科大学第二临床学院）目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３缩略词５前胃７１．实验材料９１．１实验动物及饲养９１．２主要试剂９１．３主要仪器１０１．４主要实验器械１０１．５细胞培养所需试剂１０２１．实验方法１２．１预

5、实验和实验分组１１２．２骨髓来源的树突状细胞的获取１１２．３流式细胞技术检测细胞表型１４２ＥＬＩＳＡ４．４检测细胞因子分泌水平１２．５ＭＴＳ检测法１５２．６统计学分析１５３．实验结果１６讨论２６存在问题与展望３７Ｓ论３８参考文献３９文献综述４４攻读学位期间发表文章情况５１致谢５２屋明医科大学硕±硏究生学位轮文雷帕霉素对树突细胞免疫表型影响的巧步研究硕±研究生：赵越指瓢师二张捷搬中文摘要研巧目的：检测雷帕霉素

6、对树突状细胞的免疫表型和其细胞因子的分泌水平变化的影响，，研巧树突状细胞从未成熟到成熟的生理变化为后期的树突细胞在动物器官移植免疫耐受的作用研究提供实验数据。６－８ＳＤ研究方法：取周大大鼠（雄性）胚骨和股骨，在无菌条件下冲洗出骨髓－ｍ细胞ｆｉｃｏｌｌ，所得的０％，ＧＭＣＳＦ〇ｎｇ／ｌ），用法滤过去除部分红细胞细胞在１胎牛（ｌ－和比４（５ｎｇ／ｍｌ）ＲＰＭＩ１６４０培养基内培养，隔天给予半换液，并且加浓度相同Ｍ－ＣＳＦ化－的Ｇ、４，期间用光学显微镜观察各组树突状细胞的外形变化。在培养到第４天时，Ａ

7、组加入雷帕霉素日ｎｇ／ｍｌ，Ｂ组加入雷帕霉素３０ｎｇ／ｍｌ，Ｃ组加入雷帕霉素６０ｎｇ／ｍｌ，Ｄ组不予处理。２４小时后收集细胞培养上清液检测四组之间－－－－２、。、化、比６化１０和化１２的分泌水平离屯收集细胞Ｗ流式细胞仪检测不同８０ＭＨ－组树突状细胞表面ＣＤ、ＣＤ８６、ＣＤ１０３和ＩＩ的差异。１研巧结果．雷帕霉素对树突细胞因子分泌水平的影响：收集培７天的细胞：养上清敵！＾酶联免疫吸附实验的方法检测４组的细胞因子分泌情况。实验数据显示雷帕霉素可Ｗ对树突状细胞的细胞因子的分泌量产生影响，而不同剂量的雷帕

8、５ｎ／３０ｎｎ霉素对其影响也是不同的，在本实验中ｇｍｌ和的ｌ的剂量对其影响比较明显．：。２雷帕霉素对树突状细胞免疫表型的影响在培养的第７天收集各组树突状细胞，Ｗ流式细胞仪检测巧胞表面分子的表达，实验结果显示雷帕霉素对处－理后的树突状细胞表面分子的表达产生影响，其中ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＭＨ