间充质干细胞对哮喘大鼠notch信号通路的调节作用

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1、Ｒ５６２．２；１０４４０分类号：单位代码０：２０１２２１０１密级＿：么开学号⑥溝透掌巧硕±学位论文间充质干细胞对時喘大鼠Ｎｏｔｃｈ信号通路的调节作用ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｏｎＮｏｔｃｈｓｉｎａｌｉｎｇａｔｈｗａｉｎａｓｔｈｍａｔｉｃｒａｔｓｇｐｙ研巧生：田丽君指导教师：吴福捻敎巧协助指导教师：书跃禍教授专业名称Ｉ矣学（儿科学）：临巧所在院Ｃ系）：临床医学院

2、——一二０五年王月十日二年九月：入学日期：二〇日论文完成日期原创任声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下（或我个人）进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得滨州医学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本声明的法律责任由本人承担。＾乃？於Ｊ月研究生签名：巧爾爱时间：

3、年仪日关于论文版权使用授权的说明本人完全了解滨州医学院有关保留、使用学位论文的规定，良Ｐ；学校有权保留送交论文的复印件和电子材料，允许论文被查阅和借阅；本人授权滨州医学院可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）■研宛生签名；巧闲寒导师签名：為时间；７？片年方月片日ｉ摘要、ｏｔｃｈ目的探讨哮喘大鼠淋己液血液、肺组织中Ｎ信号通路的变化特点，化及人胎盘间

4、充质干细胞在哮喘大鼠化１ｘｈ信号通路调节作用的研究。方法采用ＩＶ型胶原酶酶消化法体外分离培养并扩増人胎盘间充质干细胞，体外培养后进行细胞传代、细胞计数，生长曲线标记、细胞表面标记鉴定Ｗ及成骨、成脂诱导分化实验来鉴定胎盘间充质干细胞；建立哮喘大鼠模型；进斤人胎盘间充质干细胞通过大鼠尾静脉移植治疗：３０只雄性ＳＤ成年大鼠被随机分为３姐，每组１０只：（１）正常对照组（２）哮喘模型组（３）人胎盘间充质干细胞移植组；在最一、血后次激发大鼠后，收集大鼠肺组织液、淋巴液，分别提取血液、淋

5、己液中（ＭＮＣ）ＰＣＲ分别检测单个单个核细胞，采用实时巧光定量核细胞及肺组织中受体Ｎｏｔｃｈｌ、Ｎｏｔｃｈ２、Ｎｏｔｃｈ３及配体Ｊａｇｇｅｄｌ、Ｄｅｌｔａ４ｍＲＮＡ的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测肺组织中相关受体及配体的表达。结果１．鉴定人胎盘间充质干细胞的分离、培养、细胞表面标记及多项分化能力：采用ＩＶ型胶原酶酶消化法分离培养人胎盘ＭＳＣｓ；伴随细胞传代次数的逐渐増加，人胎盘ＭＳＣｓ增殖能力出现降低，细胞出现调亡；流式细胞术检测细胞高表法骨髓间充质干细胞表

6、面标记ＣＤ巧、ＣＤ９０、ＣＤ１０５，造血干细胞表面标记ＣＤ３４、ＣＤ４５、ＨＬＡ－抓表达很低，甚至几乎为阴性；体外诱导分化实验表明，我们分离培养的人胎盘ＭＳＣｓ可向成骨细胞和成脂细胞等方向分化，说明具有多项分化潜能。２一－．在最后２４小时内收集大鼠肺组织ＰＣＲ次对大鼠进行激发后，ＲＴ检测哮喘组肺组织Ｎｏｔｃｈｌ、Ｎｏｔｃｈ２、ＪａｇｇｅｄｌｍＲＮＡ的表达显著高于ｈＰＭＳＣｓ移植姐和正常组（Ｐ〈０．０５），Ｎｏｔｃｈ３、Ｄｅｌｔａ４ｍＲＮＡ表达较ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组表达显著

7、下调（Ｐ〈０．０５），ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组表达差异不具有统计学意义。一－３．在最后次对大鼠进行激发后２４小时内收集大鼠血液，ＲＴＰＣＲ检测哮喘组血液中单个核细胞Ｎｏｔｃｈｌ、Ｎｏ１ｘｈ２、ＪａｇｇｅｄｌｍＲＮＡ的表达显著高于ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组（Ｐ〈０．０５），化ｔｃｈ３、Ｄｅｌｔａ４ｍＲＭ的表达较ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组表达显著下调（Ｐ〈〇．０５），ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组表达不具有统计学意义。４一－．在最后次对大鼠进行激发后２４小时内收集大鼠淋己液，Ｒ

8、ＴＰＣＲ检测哮喘ｏｔｃｈ－组淋己液中单个核细胞Ｎｌ、Ｎｏｔｃｈ２、ＪａｇｇｅｄｌｍＲＮＡ的表达显著高于ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常組（Ｐ＜０．０５），Ｎｏｔｃｈ３、Ｄｅｌｔａ４ｍＲＮＡ的表达较ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组表达显著下调（Ｐ〈〇．〇５），ｈＰＭＳＣｓ移植组和正常组表达差异不具有统计学意义。５．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析肺组织中哮喘组化ｔｃｈｌ、化ｔｃｈ２、Ｊａｇｇｅｄｌ蛋白的表达湿著高于ｈＰＭＳＣｓ移植沮和正常组（Ｐ＜０．０５），Ｎｏｔｃｈ３、Ｄｅｌ