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《人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中notch通路信号》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、生理学报ActaPhysiologicaSinica,June25,2007,59(3):267-272267http://www.actaps.com.cn研究论文人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch通路信号分子表达的变化邢莹1,2,*，白瑞樱1,2，鄢文海1,3，韩雪飞1，段萍1,2，许燕1,3，樊志刚1郑州大学基础医学院1干细胞研究中心；2生理学教研室；3病理生理学教研室，郑州450052摘要：本研究探讨Notch信号通路在人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)体外增殖及向
2、神经细胞分化过程中的作用。采集健康自愿者骨髓，体外培养获得hMSCs，取第3代hMSCs，在诱导剂(β-ME,DMSO,BHA)作用下向神经细胞分化。诱导后用免疫细胞化学鉴定神经元特异性烯醇化酶(neuron-specificenolase,NSE)和尼氏体的表达以确定诱导效果；用流式细胞术检测细胞生长周期时相的变化。在诱导前后，用免疫荧光和RT-PCR方法检测Notch通路中Notch1受体蛋白、配体Jagged1(JAG1)、调节蛋白活化相关物早老素1(presenilin1,PS1)、靶基因hairyandenhancerofsp
3、lit1(HES1)信号分子表达的变化。结果显示：诱导前，处于G/G期的hMSCs占58.5%，S+G/M期的细胞占41.5%；诱012导后，G/G期细胞比例升高，而S+G/M期细胞比例下降，NSE阳性细胞率达(77±0.35)%，细胞质中可见深蓝色的块状012或颗粒状尼氏体。免疫荧光显示，诱导前后hMSCs内Notch1和JAG1均呈阳性表达，但RT-PCR检测发现诱导后Notch1、JAG1、PS1和HES1mRNA表达量较诱导前明显降低(均P<0.05)。结果表明，诱导hMSCs向神经细胞分化能抑制Notch信号分子表达，低水平的
4、Notch信号激活可能有利于神经细胞的分化。关键词：骨髓间充质干细胞；Notch1；JAG1；早老素1；HES1；分化；神经细胞中图分类号：R331ExpressionchangesofNotch-relatedgenesduringthedifferentiationofhumanmesenchymalstemcellsintoneuronsXINGYing1,2,*,BAIRui-Ying1,2,YANWen-Hai1,3,HANXue-Fei1,2,DUANPing1,2,XUYan1,3,FANZhi-Gang11TheStem
5、CellsResearchCenter;2DepartmentofPhysiology;3DepartmentofPathophysiology,CollegeofBasicMedicalSciences,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,ChinaAbstract:TheNotchsignalingpathwayhasbeenimplicatedintheregulationofcell-fatedecisionssuchasdifferentiationofembryostemcellsandn
6、euralstemcellsintoneurons.Weculturedhumanmesenchymalstemcells(hMSCs)invitroandinducedhMSCstodifferentiateintoneuralcellsbyβ-mercaptoethanol(β-ME),DMSOand3-tert-butyl-4-hydroxyanisole(BHA).Immunocytochemistrywasutilizedtodetectneuron-specificenolase(NSE)andNisslbody,andfl
7、owcytometrywasusedtodeterminecellgrowthphases.TheexpressionsofsignalmoleculesinvolvedintheNotchpathwaysuchasNotch1,Jagged1(JAG1),presenilin1(PS1)andhairyandenhancerofsplit1(HES1)wereobservedbyRT-PCRandimmunofluorescenttechniques.Theresultswereasfollows:(1)Beforeinduction
8、,thepercentageofhMSCsatG/Gwas58.5%,andthepercentageatS+G/Mwas41.5%.Afterinduction,thepercentageofhMSCsa
