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时间:2019-03-12
《间充质干细胞对哮喘大鼠notch信号通路的调节作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、R562.2;10440分类号:单位代码0:20122101密级_:么开学号⑥溝透掌巧硕±学位论文间充质干细胞对時喘大鼠Notch信号通路的调节作用RegulationofmesenchymalstemcellsonNotchsinalingathwainasthmaticratsgpy研巧生:田丽君指导教师:吴福捻敎巧协助指导教师:书跃禍教授专业名称I矣学(儿科学):临巧所在院C系):临床医学院
2、——一二0五年王月十日二年九月:入学日期:二〇日论文完成日期原创任声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下(或我个人)进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加W标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得滨州医学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本声明的法律责任由本人承担。^乃?於J月研究生签名:巧爾爱时间:
3、年仪日关于论文版权使用授权的说明本人完全了解滨州医学院有关保留、使用学位论文的规定,良P;学校有权保留送交论文的复印件和电子材料,允许论文被查阅和借阅;本人授权滨州医学院可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)■研宛生签名;巧闲寒导师签名:為时间;7?片年方月片日i摘要、otch目的探讨哮喘大鼠淋己液血液、肺组织中N信号通路的变化特点,化及人胎盘间
4、充质干细胞在哮喘大鼠化1xh信号通路调节作用的研究。方法采用IV型胶原酶酶消化法体外分离培养并扩増人胎盘间充质干细胞,体外培养后进行细胞传代、细胞计数,生长曲线标记、细胞表面标记鉴定W及成骨、成脂诱导分化实验来鉴定胎盘间充质干细胞;建立哮喘大鼠模型;进斤人胎盘间充质干细胞通过大鼠尾静脉移植治疗:30只雄性SD成年大鼠被随机分为3姐,每组10只:(1)正常对照组(2)哮喘模型组(3)人胎盘间充质干细胞移植组;在最一、血后次激发大鼠后,收集大鼠肺组织液、淋巴液,分别提取血液、淋
5、己液中(MNC)PCR分别检测单个单个核细胞,采用实时巧光定量核细胞及肺组织中受体Notchl、Notch2、Notch3及配体Jaggedl、Delta4mRNA的表达,Westernblot检测肺组织中相关受体及配体的表达。结果1.鉴定人胎盘间充质干细胞的分离、培养、细胞表面标记及多项分化能力:采用IV型胶原酶酶消化法分离培养人胎盘MSCs;伴随细胞传代次数的逐渐増加,人胎盘MSCs增殖能力出现降低,细胞出现调亡;流式细胞术检测细胞高表法骨髓间充质干细胞表
6、面标记CD巧、CD90、CD105,造血干细胞表面标记CD34、CD45、HLA-抓表达很低,甚至几乎为阴性;体外诱导分化实验表明,我们分离培养的人胎盘MSCs可向成骨细胞和成脂细胞等方向分化,说明具有多项分化潜能。2一-.在最后24小时内收集大鼠肺组织PCR次对大鼠进行激发后,RT检测哮喘组肺组织Notchl、Notch2、JaggedlmRNA的表达显著高于hPMSCs移植姐和正常组(P〈0.05),Notch3、Delta4mRNA表达较hPMSCs移植组和正常组表达显著
7、下调(P〈0.05),hPMSCs移植组和正常组表达差异不具有统计学意义。一-3.在最后次对大鼠进行激发后24小时内收集大鼠血液,RTPCR检测哮喘组血液中单个核细胞Notchl、No1xh2、JaggedlmRNA的表达显著高于hPMSCs移植组和正常组(P〈0.05),化tch3、Delta4mRM的表达较hPMSCs移植组和正常组表达显著下调(P〈〇.05),hPMSCs移植组和正常组表达不具有统计学意义。4一-.在最后次对大鼠进行激发后24小时内收集大鼠淋己液,R
8、TPCR检测哮喘otch-组淋己液中单个核细胞Nl、Notch2、JaggedlmRNA的表达显著高于hPMSCs移植组和正常組(P<0.05),Notch3、Delta4mRNA的表达较hPMSCs移植组和正常组表达显著下调(P〈〇.〇5),hPMSCs移植组和正常组表达差异不具有统计学意义。5.Westernblot分析肺组织中哮喘组化tchl、化tch2、Jaggedl蛋白的表达湿著高于hPMSCs移植沮和正常组(P<0.05),Notch3、Del
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