结肠癌细胞vcr耐药株的建立及相关mirna筛选

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1、同等学力人员申请硕±学位论文：１０４７２中图分类号Ｒ３９２单位代码：５０２１２００６：密级申请号：公开ｋＭ咨ｉ硕±学位论文结肠癌细胞ＶＣＲ耐药株的建立及相关ｍｉＲＮＡ筛选ＥｓｔａＷ－ｎｉｓｈｍｅｎｔｏｆｔｈｅＶＣＲＤｒｕｇｒｅｓｉｓｌ：ａｎｔＳｔｒａｉｓｏｆＣｏｌｏｎＣａｎｃｅｒＣｅｌｌｓａｎｄ化ｅＲｅｌａｋｄｍｉＲＮＡＳｃｒｅｅｎｉｎｇ作者姓名：张小燕导师姓名：王天云学科口裝医学专业名称：免疫学培养院系：基础医学院完成时间二〇—：五年Ｈ月Ｔｈｅ－ｅｘｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆａｅｌｉｎａｎｄ

2、ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１８ｉｎａ村ｅｎｔｓｐｐｐｗｉｔｈｏｌｃｓｔｉｃｏｖａｒｓｎｄｒｏｍｅｐｙｙｙｙＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄｆｏｒ化ｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＣａｎｄｉｄａｔｅ：ｚｈａｎｇｘｉａｏｙａｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ｗａｎｇｔｉａｎｙｕｎＴｈｅＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔ：ｅｄＨｏｓｉｔａｌＯｆｐＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的？研究成果。除了文中特别加ｙ标注引用的内容外，本

3、论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担：：日期：月日作者签名豕寺獻么！王年亡＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进。行检索、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文，可Ｗ采用影印＂＂本学位论文属于Ｖ）：（请在Ｗ下相应方框内打１．保密□，在

4、＿年解密后适用本授权书。２．不保密口。：作者签名：＾小栽日期為！许Ｘ月日ｙ＂■；５导师签名：日期下叫年月日目录摘要（１）Ａｂｓｔｒａｃｔ（３）前胃（５）１材料与方法（５）２结果（１１）３讨论（２２）４结论２（５）参考文献（２７）综述：ｍｉＲＮＡ在肿瘤细胞耐药中的作用研究（２９）缩略词表（３８）攻读学位期间发表文章情况（３９）４０纖（）个人简历（４１）新乡医学院硕±学位论文结肠癌细胞ＶＣＲ耐药株的建立及相关ｍｉＲＮＡ筛选摘要背景肿瘤细胞耐药是导致肿瘤化学治疗失败的重

5、要原因，长春新碱ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ，（ＶＣＲ一ＶＣＲ产是类广泛用于肿瘤治疗的化学药物，）。但是长期使用可使肿瘤细胞对生耐药性，肿瘤耐药机制仍不清楚。本研究探讨与结肠癌耐药的微小ＲＮＡｍｉｃｒｏＲＮＡ（，ｍｉＲＮＡ，旨在揭示肿瘤耐药机制及为肿瘤细胞耐药逆转提供基础。）目的建立长春新碱耐药结肠癌细胞模型，筛选与结肠癌细胞ＶＣ民耐药相关的ｍｉＲＮＡ〇方法－－１ＨＣＴＶＣＲ梯度诱，．培养结肠癌８细胞，采用导建立ＨＣＴ８／ＶＣ民耐药细胞株。２．采用全基因组筛选的研究策略，运用ＨｉＳｅｑ２５００测序技术和生物信息学的方法，检测和分析耐药ＨＣＴ－８－／Ｖ

6、ＣＲ细胞的和非耐药的ＨＣＴ８细胞差异性表达的ｍｉＲＮＡｓ，构建其ｍｉＲＮＡ的差异表达谱。３．针对鉴定的差异ｍｉＲＮＡ，通过祀基因预测软件进行祀位点确认，通过範基因所在基因的ＧＯ进行功能注释。结果１ＶＣ民建立了ＶＣ艮耐药的结肠癌细胞ＨＣＴ－ＶＣＲＨＣＴ－／ＶＣＲ．利用浓度梯度的８／，８３细胞在２ｘｌ〇ｎｇ／ｍＬＶＣＲ中生长良好。２．共进行了１６５１种ｍｉＲＮＡ测序８，其中有差异的有４种ｍｉＲＮＡ，与非耐药的结肠癌－ＨＣＴ８２４ＲＮＡ户＜．１７ＲＮＡ表细胞巧比，种ｍ００５，ｉｉ差异具有统计学意义）其中有种ｍ（Ｐ＜０－－－达上调．０５。ｈｓａｍｉ民６７

7、５３表达量上调最高，高达７．４９７６８１倍，其次是（）ｐ－－－－－－－－－－－－ｈｓａｍｉ艮１００３，ｈｓａｍｉＲ１２化ｌ３ｈｓａｍｉＲ５８２５ｈｓａｍｉＲ３１４Ｔｉｃｈｒｌ５１００５５ｐｐ，，，，ｐ＿－－－－－－－－ｈｓａｍｉ民５８２５ｈｓａ５８２３ｈｓａ；３６８７。７种ｍｉＲＮＡ表达下调户＜０ｍｉＲｍ化．０５，ｐ，ｐ，（）下调－－－－ｍ－－－－－最高的是ｈｓａｍｉＲｌ４６ａ５ｐ，下调７．７５１９９倍，其次是ｈｓａｉＲ１２４７３ｐ，ｈ