探析蛋黄蛋白质酶解制备降血压肽的研究

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1、分类号I醒2iUDC虚丝：，Y·‘9169811密级继硕士学位论文蛋黄蛋白质酶解制备论文答辩日期降血压肽的研究孙秀华学科专业丝堂王茎指导教师廛墨蓥副教援2006．5．19学位授予13期答辩委员会主席童韭洼熬攫2006．6论文评阅人夏璐熬援睦d!鹏教援广两大学硕士学位论文蛋黄蛋白质酶解制备降血乐肽的研究蛋黄蛋白质酶解制备降血压肽的研究。摘要高血压是一种慢性的心脑血管疾病，是冠心病、脑卒中等心脑血管疾病的主要危险因素。据统计，全世界每年因高血压引起的心脑血管疾病的死亡人数超过260万，高血压病已成为全球·陛的重大的公共卫生问题。降血压肽是一种具有生物活性的肽，

2、它通过抑制血管紧张素转换酶(ACE)活性而达到降血压的作用。可广泛地应用于现代食品、保健品、医药等各领域。食物蛋白来源的降血压肽无毒、无副作用，采用酶解方法水解过程易于控制，价廉易于推广。本文通过筛选出蛋黄蛋白质制备降血压肽的蛋白酶，系统地研究了酶反应条件对降血压肽制备的影响，并给出了各自适宜的反应条件。产物体外活性检测方法采用高效液相色谱分析，检测条件为：柱HypersiIC，。4．O*250nm，5pm；检测波长228nm=柱温30*(2；流动相MeOH：H20=15：85(含0．1％THF)；流速1．OmL／min，体系中马尿酸与其它物质能够进行很好

3、地分离。广西大学硕士学付论文蛋黄蛋白质酶解制各降血压肽的研究采用酶法制备降血压肽，以不同种类蛋白酶对用不同方法处理的原料蛋白质进行酶解，结果均显示碱性蛋白酶的水解产物对ACE的抑制活性最高。超临界萃取蛋白质酶解产物抑制率高达72．81％，且蛋白质回收率为78％，选择具有对ACE体外抑制活性最高的碱性蛋白酶作为制备蛋黄降血压肽的最佳用酶。实验中考察了水解时间、温度、pH值、底物浓度及加酶量变化时水解度随时间的变化情况，得到蛋黄蛋白质酶解作用的最适水解时间为300min、温度为45"C、pH为9．5、底物浓度为6．3％、加酶量为7％。在此条件下，蛋黄蛋白质水解

4、物对血管紧张素转换酶(ACE)的半抑制浓度IC”为1．22mg／mL。用活性炭对蛋黄蛋白质水解液进行脱色处理，方法简单可行，以酶解液脱色率和蛋白质损失率作为考察指标，得出活性炭对蛋黄蛋白酶解液脱色的适宜条件为：活性炭用量2％、酶解液pH为3．5、脱色温度40"C、吸附时间30min，此时蛋黄降压肽酶解液脱色率为87％，蛋白质损失率为15％。关键词：蛋黄蛋白质酶解降血压肽n，、EnzymatichydrolysisangiotensinI-convertingenzymeinhibitorfromchickeneggyolkABSTARCTHypertens

5、ion，onekindofchroniccardio-andcerebro-vasculardiseases，isthemainriskfactorofcoronaryheartdisease(CHD)andcerebralapoplexy．Itwasreportedthatmorethan2600thousandsofpeoplediedfromtheeardio··andcerebro··vasculardiseasesresultedfromhypertensioneveryyearallovertheworld．Now,hypertensionha

6、sbecomethegreatpublicsanitaryproblemintheworld．AntihypertensiVepeptideisakindofbiologicallyactivepeptide，angiotensinconvertingenzymeinhibitory(ACEI)showangiotensinconvertingenzyme(ACE)inhibitoryactivityandregulatethebloodpressure．Nowadays，ACEIarewidelyusedinthemodemfoods，healthpro

7、ducts，medicinedrugsandSOon．Foodsprotein-derivedACEI，knownasACEI，whichareconsideredassaferandmorenatural，Enzymatichydrolysiscantobecontrolled，cheapnessandmakemorewidespread．Thehydrolysisconditionsofantihypertensivepeptidewereinvestigatedsystematically，Thesuitablehydrolysiscondition

8、swereasfollows：Highperformanceliq