探析蜂胶中黄酮类化合物的富集分离研究

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1、江南大学硕士学位论文蜂胶中黄酮类化合物的富集分离研究姓名：郑洁申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：彭奇均20070601摘要论文题名：蜂胶中黄酮类化合物的富集分离研究论文作者：郑洁导师姓名：彭奇均作者专业：化学工艺蜂胶是自然界中黄酮含量最高、种类最多的物质，具有广泛的生物药理学价值。国内因生产技术水平的问题，所得蜂胶产品中总黄酮含量较低，影响出口价格，如何提高蜂胶总黄酮含量是现今急需解决的问题。另外，蜂胶中单体黄酮若能逐个分离，将对有关于黄酮的新药开发与研究有着重大的意义。本文主要围绕蜂胶总黄

2、酮的提取和单体黄酮的分离进行研究。蜂胶黄酮类含量测定方法研究：比较了AlCl3比色法和NaN02-m(N03)3比色法测定蜂胶总黄酮，研究表明，一aCl3比色法测定蜂胶总黄酮含量更可靠。研究了测定过程中显色剂浓度、放置温度及时间等对测定的影响，确立了快速准确测定蜂胶总黄酮的方法，蜂胶中总黄酮与-dCl3络合形成稳定的黄色配合物，在波长420rim处测定显色吸光度，以芦丁为标样，在0-40吲mL范围内，服从比耳定律，回归方程A=0．02370．0，o004，r=0．9997。方法的平均加样回收率达97

3、．8％，相对标准偏差(RsD)为1．6％，检测限为O．002mg／mL。树脂法富集蜂胶总黄酮工艺研究；1)醇提水沉法制备蜂胶乙醇水溶液作为树脂法富集蜂胶总黄酮的样品液。通过单因素及正交实验探讨了蜂胶水溶液制备条件对总黄酮得率的影响，结果显示影响总黄酮得率的因素主次顺序为加水量>乙醇中溶解的蜂胶量>温度>时间。2)通过合成不同物理、化学性能的大孔树脂研究树脂骨架结构、比表面积、孔径对吸附蜂胶总黄酮的影响。研究发现极性共聚单体(甲基丙烯酸甲酯或丙烯酰胺)的加入、较大的比表面积和孔径对吸附总黄酮都有利。合

4、成富集总黄酮条件较优的树脂(2％丙烯酰胺共聚单体、比表面积700m2／g，孔径14nm的大孔苯乙烯树脂)对蜂胶总黄酮工艺进行研究，得出大孔树脂法富集蜂胶总黄酮的条件：35"(2下静态吸附5h，动态洗脱时75％(v／v)乙醇为最佳洗脱剂，7BV用量即能洗脱90％以上吸附在柱上的总黄酮。最终产物的总黄酮含量为36-38％，相对于未经树脂法处理的蜂胶中25％左右的总黄酮含量有较大提高，总回收率70％以上。黄酮单体分离研究：1)通过pn梯度萃取法分离了蜂胶中酸性不同的7。4’．二羟基类黄酮和7-羟基类黄酮。

5、研究了酸化pH对最终产物中黄酮单体含量及回收率的影响。最终分别得产物l(主要含芦丁11．8％、杨梅素12．7％、槲皮素17．7％和芹菜素3．9％)、产物2(柯因16．1％、高良姜素12．4％)、产物3(松属素15．3％)，相对于未经分离的乙醇提取蜂胶中这几种单体黄酮含量提高了2-13倍不等。2)通过硅胶薄层层析研究了硅胶处理条件及展开剂。将薄层层析的条件用于硅胶干柱层析，分离得到8种黄酮类化合物单体，效果与硅胶薄层相近，且耗时短，毒性溶剂消耗少，最后所得产物中单体纯度江南大学硕士学位论文基本都超过6

6、0％。关键词：蜂胶、黄酮、大孔树脂、pH梯度萃取、干柱色谱Ⅱ摘要Title：StudyontheEnrichmentandSep删onofFlavonoidsinPropolisAuthor：ZhengJieMentor：PengQi-junMajor：ChemicalEngineeringandTechnologyABSTRACTPropolisisthenaturalbeeproductcontainshighestconcentrationandmostkindsofflavonoidsinw

7、orld,withwidelybiologicalandpharmacologicalvalue．Nowadays，flavonoidsconcentrationofpropolisislowbecausetheunsatisfieddomestictechnologywhichaffectstheexportpriceofpropolis．It’SnOWofgreatneedtosolvethisproblem．Anditwillalsobeofgreatmeaningtonewmediciner

8、esearchanddevelopmentrelatedtoflavonoidsifthesingleflavonoidcanbeseparatedrespectively．Thispaperdwellontheenrichmentoftotalflavonoidsinpropolisandseparationofitsmainsingleflavonoid．Studyondeterminationofflavonoids：AICl3colorimetricmetho