白芸豆中α-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提取纯化、组成结构及生物活性研究

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1、西北大学博士学位论文白芸豆中α-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提取纯化、组成结构及生物活性研究姓名：杨明琰申请学位级别：博士专业：化学工程指导教师：宋纪蓉20080606摘要本文采用现代分离纯化技术从白芸豆中分离提取得到单一组分的0【．淀粉酶抑制剂(Q．舢)糖蛋白，对其生物学性质、超滤提取工艺、生物降糖、降脂活性及结构与功能之间的构效关系进行了系统的研究。采用柱色谱分离技术从白芸豆中分离得到单一组分的甜舢，其为相对分子量为36000Da的糖蛋白，对猪胰旷淀粉酶具有较高的抑制活性，抑制类型呈非竞争性抑制。白芸豆0c枷糖蛋白对温

2、度、pH具有较高的稳定性。白芸豆a．舢糖蛋白中蛋白质含量占88．2％，蛋白质中含有17种常见氨基酸，其中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸和苏氨酸占有较高的比例；糖链中单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖，其摩尔比为2．42：1．50：1．52：1．00，糖链中单糖残基以c【．糖苷键连接。糖蛋白中蛋白质和糖链的连接方式为O．糖肽键。构效关系研究结果表明a．AI糖蛋白中单独的糖链和蛋白链都没有生物活性，只有糖链和蛋白链结合在一起形成完整的糖蛋白时，才对猪胰Q．淀粉酶具有抑制活性。分别采用有机膜超滤和无机膜超滤对白芸豆提取液中

3、a．舢糖蛋白的浓缩提取工艺进行了对比研究。结果表明截留分子量为10000Da的有机超滤膜更适合白芸豆中a．灿糖蛋白的分离浓缩。其最佳工艺条件为操作压力O．8MPa，物料质量分数7％(1：15)，物料温度35℃，物料pH为自然pH。在此条件下，其稳定膜通量为35．6Um2h，体积浓缩倍数为8．3倍，多糖的截留率为20．1％，蛋白质的截留率为72．7％，活性物质收率为80．6％。对白芸豆中a．～的食用安全性和生物降糖、降脂活性进行了研究。结果表明0【．灿无急性毒性；Q．舢能显著降低四氧嘧啶糖尿病大鼠的空腹血糖，降低餐后

4、血糖峰值，增加其淀粉耐量；a．越能显著降低高血脂模型大鼠血清的TG、TC和LDLC含量，升高HDL广C含量，具有调节高血脂模型大鼠血脂的功效。关键词：白芸豆；Q．～；提取纯化；组成结构；超滤；生物活性AbstractAhomogeneousglycoproteiIl0【-锄ylaseinhibitor@·AI)w勰extracted觚dpurified五romwhite“dneybe强s(融口seD胁sy“自弘，．西．L)byaseriesofmodemtechnolo酉es．nebiochemicalchar拟e

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