莱菔硫烷对eae小鼠脾组织中各辅助性t细胞亚型比例及相关炎性因子表达的影响及机制探讨

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时间:2019-03-10

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2、内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。研究生签名:誊幸导师签章:西易劢r岁年岁月2/日目录IUllIIIIIIllllIIIIILlllllIIIIIIllUllIlllY2337630中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文莱菔硫烷对EAE小鼠脾组织中各辅助性T细胞亚型比例及相关炎性因子表达的影响及机制探讨前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5日lJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12多日刁≮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l么附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24参考文献⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24综述Nrf2/ARE通路的免疫调节作用及辅助性T细胞在多发性硬化中的作用及机制探讨⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37中文摘要莱菔硫烷对EAEd、鼠脾组织中各辅助性T细胞比例及相关炎性因子表达的影响及机制探讨摘要目的:利用多发性硬化的经典动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(ExperimentalAutoimmuneEncephalo

5、myelitis,EAE)小鼠,研究莱菔硫烷对EAE小鼠脾组织中Thl、Th2、Thl7细胞的比例及相关炎性因子表达水平的影响,初步探讨莱菔硫烷对EAE小鼠的免疫调节作用和可能的作用机制,以进一步深入挖掘多发性硬化的可能发病机制,为新的治疗方向和方法提供有意义的基础实验依据。方法:取54只8.10周龄、体重18.20克的C57BL/6雌性小鼠,随机分为三组:正常对照组、EAE组及莱菔硫烷组,每组小鼠各18只。利用MOG35.55合成多肽作为抗原,辅以完全弗氏佐剂、百日咳毒素及结核菌素,对EAE组和

6、莱菔硫烷组小鼠进行免疫以建立EAE的动物模型。免疫当天记为第0天。自免疫第1天开始,莱菔硫烷组小鼠给予莱菔硫烷溶液50mg/kg隔日腹腔注射,正常对照组和EAE组小鼠给予等体积生理盐水隔日腹腔注射,并且每日两次观察各组小鼠的体重变化和发病情况,并进行临床神经功能评分。于发病高峰期在各组发病小鼠中随机选取各6只处死。无菌条件下取出处死小鼠的脾进行实验。利用流式细胞学的方法检测小鼠脾组织中Thl、Th2和Thl7细胞的比例;利用酶联免疫吸附测定法(双抗体夹心法)测定小鼠脾细胞培养液上清液中IFN小IL

7、.4、IL.6、IL.10、IL.12及IL.17A的表达水平。结果:1各组小鼠临床表现:正常对照组小鼠无发病;莱菔硫烷组小鼠与EAE组小鼠相比,其发病率、体重减轻程度及发病高峰期(免疫第20天)的临床神经功能评分均明显降低(氏O.05)。2各组小鼠脾组织中Thl、Th2和Thl7细胞比例的比较:于发病高峰期,莱菔硫烷组、EAE组及正常对照组比较,Thl7细胞比例有明显差异,EAE组Thl7细胞比例较正常对照组明显升高(氏O.05),莱菔硫烷组中文摘要Thl7细胞比例较EAE组明显降低(尸

8、5);各组小鼠脾组织中Thl和Th2细胞所占的比例无明显统计学差异。3各组小鼠脾细胞培养液上清液中IFN.儿IL.4、IL.6、IL.10、IL.12及IL.17A浓度的比较:于发病高峰期,莱菔硫烷组、EAE组及正常对照组相比较,IL.6、IL.10和IL一17A浓度有明显差异,EAE组小鼠脾细胞培养液上清液中IL.6和IL.17A的浓度较正常对照组明显升高(尸

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