自然铜、鹿衔草抑制裸鼠肺癌骨转移机制的研究

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1、论文题目：自然铜、鹿衔草抑制裸鼠肺癌骨转移机制的研究答辩委员会主席：程锦国答辩委员会成员：陈捷刘长宝论文答辩日期：2013年5月22日目录1．英文缩略词及中文对照⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12．中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．23．英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34．引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45．第一部分肺癌骨转移裸鼠模型的建立和评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．65．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．65．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．95．3讨论与分析⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．96．第二部分自然铜、鹿衔草对裸鼠肺癌骨转移模型中ICAM-1的抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯126．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯126．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．156．3讨论与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯177．第三部分自然铜、鹿衔草对裸鼠肺癌骨转移模型中MMP一9的抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．197．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．197．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20

3、7．3讨论与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯228．第四部分自然铜、鹿衔草对裸鼠肺癌骨转移模型中PTHrP的抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．248．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．248．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯258．3讨论与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯279．，J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2910．参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3011．附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3112．致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．3213．综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3314．独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39缩略名英文缩略词及中文对照英文全称中文名称ICAM一1IntercellularAdhesionMolecule．1细胞间粘附分子．1MMP-9MatrixMetallopeptidase-9PTHrPParathyroidHormone—relatedProtein基质金属蛋白酶．9甲状旁腺激素类蛋白Real—timeFuoreseentquantitativePolymerase实时荧光定量聚合qRT-PCRCha

5、inReaction酶链式反应RT-PCR暨寥en趾scdption-Pol脚erascc№K．eacUon逆转录聚合酶链式反应eDNAComplementaryDeoxyribonucleicAcid互补脱氧核糖核酸mRNAMessengerRibonucleicAcidSRESSkeletalRelatedEventsPBSPhosphateBufferSolutionDMSODimethylSulfoxide信使核糖核酸骨相关事件磷酸盐缓冲液二甲基亚砜温州医学院硕士学位论文自然铜、鹿衔草抑制裸鼠肺癌骨转移机制的研究中文摘要目的：探讨自然铜、鹿衔草对裸鼠肺癌骨转移模型的骨转移抑

6、制的机制。方法：取4周龄、体重15"--209裸鼠，每只裸鼠右胫骨骨髓腔内注射0．1mlA瀚肺癌细胞悬液，21天后建立肺癌骨转移模型。将造模裸鼠随机分为自然铜组、鹿衔草组、联合给药组(自然铜与鹿衔草联合溶液)、阳性药物组(帕米磷酸二钠)及模型对照组。中药组模型裸鼠按6g·kg。1剂量隔日灌胃自然铜、鹿衔草及两者联合液，每周腹腔注射生理盐水0．16ml；阳性药物组模型裸鼠按10mg·k91剂量每周腹腔注射帕米磷酸二钠，隔天灌胃生理盐水0．5ml；模型对照组模型裸鼠隔日灌胃生理盐水0．5ml，隔周腹腔注射生理盐水0．16ml。给药三周后处死裸鼠，收集肿瘤标本。标本用4％多聚甲醛溶液固定

7、、制作组织蜡块、切片后按照相关免疫组织化学方法步骤观察标本中ICAM一1、MMP一9、PTHrP的表达情况。标本在取下后冻存于一80。C冰箱，分批次提取RNA，按照逆转录PCR步骤获得cDNA，以实时荧光定量PCR(RealtimequalityPCR)方法检测ICAM一1、MMP一9、P，I'HrP基因的表达水平。结果：对比模型对照组，各给药组的IC／抽t-1、MMP-9的基因水平及蛋白的表达量均降低，差异有统计学意义(尸以们)；联合给药组、阳性药物组的PTHrP的