自体富血小板血浆对兔膝关节软骨损伤修复作用的研究

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2、除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：瑶吨歹一／导师签名年月日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文自体富血小板血浆对兔膝关节软骨损伤修复作用的研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．j⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39综述富血小板血浆及其促进关节软骨损伤修复的研究进展⋯⋯⋯⋯42致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．50个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51中文摘要自体富血小板血浆对兔膝关节软骨损伤修复作用的研究摘要目的：关节软骨是一种特殊的致密结缔组织，其表面光滑，具有独特的生物学性能，可以使其有效的传输和分散负荷，从而能减少相邻两骨接触面的摩擦力，缓冲运动时所产生的震动。关节软骨可以在退行性骨关节病或者暴力损伤等过程中被破坏，从而引起关节软骨损伤。由于缺乏血管而且软骨细胞为终末分化细胞，所以软骨自身的修复能力极差，损伤很难自愈，尤其是未达到软骨下骨的损伤。传统的治疗软骨损伤的方法有保守治疗和手术治疗两种，保守治疗即口服非甾体抗

5、炎药物或关节内注射玻璃酸钠等，此种方法只是延缓了关节软骨损伤的进一步发展的速度，缓解疼痛程度，并没有从根本上解决关节软骨损伤问题；手术治疗则对手术指证要求比较严格并且远期疗效并不理想。为了探索治疗关节软骨损伤的新方法，本实验研究通过对l8只兔双膝关节进行软骨损伤造模后关节内注入PRP，了解PRP在软骨损伤修复过程中是否有促进作用，并对其修复组织进行大体观察及显微镜下观察，确定新生组织成分，进一步探讨PRP在促进关节软骨损伤修复过程中的作用。方法：1分组：实验用3．4月龄新西兰大白兔18只，随机分为三组，每组6只。

6、三组实验动物分别于术后第1、3、5周处死，命名为1周组、3周组、5周组。全部实验动物左膝关节内侧髁软骨为对照侧，右膝内侧髁软骨为实验侧，进行自身对照。2采血：每只实验动物均于耳中心动脉处缓慢抽取约7-8ml动脉血，其中5mI注入肝素锂抗凝的真空采血管中，2ml注入EDTA-K2抗凝的真空采血管中，备用。3PRP的制备：应用二次离心法制备PRP，第一次离心转速2000r／min，时间10min，离心后注射器吸取交界层以下2mm的红细胞并弃去，剩余部分放入离心机中配平后进行第二次离心，转速2000r／min，时间10

7、min，离心后用注射器吸取血清层的上方3／4部分并弃去，剩余部分即为PRP。5ml兔动脉血可制备约0．5mlPRP。4血小板计数：将采血时得到的EDTA-K2抗凝的2ml血液以及制成中文摘要的PRP放入血细胞分析仪中进行血小板计数。5软骨损伤造模及干预：每只实验动物均采用膝前正中切口切开膝关节前方皮肤后以髌旁内侧入路切开膝关节囊，充分暴露兔膝关节内侧髁后用手术刀片在其内侧髁正中部位制造大小约2×3mm、厚度约0．3mm的软骨缺损，然后，右膝关节腔内注入之前制备的0．5mlPRP及50ul激活剂(葡萄糖酸钙、牛凝血

8、酶)左膝不予其他干预处理。术后实验动物均不予以制动。6观察结果：空气栓塞法处死实验动物后切开关节囊暴露软骨损伤部位进行大体观察并应用国际软骨修复协会(InternationalCartilageRepairSocietyICRS)对其进行大体评价，之后对损伤修复部位进行取材制成组织切片并行HE和番红．O染色，对其进行显微镜下观察并应用奥德里斯科尔组织学评分(O’Drisc