自体富血小板血浆干预兔早期椎间盘退变的实验研究

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1、东南大学硕士学位论文自体富血小板血浆干预兔早期椎间盘退变的实验研究姓名:胡新锋申请学位级别:硕士专业:临床医学指导教师:王宕2012-05-28中文摘要自体富血小板血浆干预兔早期椎间盘退变的实验研究研究生胡新锋导师王宸东南大学医学院目的椎

2、、白J盘退变(intervertebraldiscdegeneration,IDD)早期的生物学治疗有望阻止甚至逆转其病变过程。富血小板血浆(platelet.richplasma,PRP)含多种生物活性因子,女IJPDGF、TGF.B,IGF.1、VEGF等,这些生物活性因子具有刺激椎间盘细胞增殖

3、、促进细胞外基质合成代谢及抑制纤维环细胞凋亡等功能。本研究通过全纤维环针刺法制备椎问盘早期退变模型并予以自体PRP干预,观察自体PRP对早期椎间盘退变的干预效果。方法取健康成年新西兰大白兔45只,体重2.5.3.Okg,雌雄不限。于兔耳中央动脉取血,采用Landesberg等的方法制备PRP,同时对全血及PRP行血小板计数。采用纤维环针刺(L4/5、L5/6)的方法建立椎间盘退变模型,将所有兔子随机分为3组(n=15)。实验组:在模型建立2周时将100I,tlPRP分别注fi.L4/5、L5/6椎问盘;对照组:在相同问隙注入100Lt

4、l的PBS液。假手术组:仅分离暴露椎问盘,不作任何处理。在模型建立2周时及干预后第1、2周,每组随机取5只兔子行腰椎MRI、组织学及II型胶原免疫组织化学检查,并进行兔腰椎MRI退变程度评分,HE染色形态学观察及II型胶原阳性积分光密度检测。结果血小板计数显示兔PRP中血小板约为外周血的4.92倍。模型建立两周时,和假手术组相比,实验组和对照组腰椎手术节段椎问盘T2JJB权信号降低、变暗,组织学观察示髓核细胞数量减少,基质退行性变,免疫组织化学染色示II型胶原阳性积分光密度降低,显示造模成功。PRP干预后第l、2周,同一时间点观察,腰

5、椎MRI显示实验组退变程度及评分均低于对照组,差异有统计学意义(P

6、微环境,促进组织的再生修复有关。本研究为今后临床开展自体PRP治疗椎问盘退变提供了实验依据。【关键词】自体富血小板血浆椎间盘退变生物学治疗MRIII型胶原兔英文摘要Theeffectofautologousplatelet·-richplasmaonthetreatmentoftheearly·stageintervertebraldiscdegeneration:anexperimentalstudyAbstractObjectiveTheearlybiologicaltherapyforintervertebraldiscdege

7、neration(IDD)wasexpectedtopreventorevenreversethediseaseprocess.Platelet-richplasma(PRP)containsavarietyofbioactivefactors,suchasplateletderivedgrowthfactor,transforminggrowthfactorbeta,insulin-likegrowthfactor1,vascularendothelialgrowthfactor’whichCanstimulateintervert

8、ebraldisccellproliferation,promoteextracellularmatrixsynthesisandinhibitannulusfibrosuscellapoptosis.TheaimofthisstudywastoinvestigatetheeffectofautologousPRPonthetreatmentoftheearly—stageIDDbyusingarabbitmodelofearly-stageIDD,whichwasestablishedbyusingannulusfibrosuspu

9、ncturetechnique.MethodsForty-fivehealthyNewZealandwhiterabbits(maleorfemale,weighing2.5-3.0kg)wererandomlydivi

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