胚胎干细胞移植治疗视网膜色素变性的相关研究

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：、’罗该垮签字日期：如}5年6月j一日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本

2、人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。1(保密的学位论文在解密后适用本授权书)f／∥tLlft{学位论文作者签名(手写)：哆堀碧导师签名(手写)：卢了哆肋鲁。／l，Iu签字日期：≯Df'年6月J’日签字日期：Z,o／＼年6月r日摘要目的：视网膜色素变性(Retinitis

3、pigrnentosa，RP)是一种遗传性进行性光感受器细胞丧失并最终导致视网膜变性萎缩为特征的一组疾病，目前RP还缺乏有效的治疗方法。本研究旨在通过腹腔注射碘酸钠(Nal03)造成RP小鼠模型，以探讨胚胎干细胞移植术对RP小鼠的治疗作用。材料与方法：健康C57BL／6小鼠60只，随机取出40只小鼠腹腔注射Nal03致小鼠双眼RP模型，其余20只小鼠腔腹注入等量生理盐水。建模后第7天，将所有RP模型小鼠的左眼于视网膜下腔注射绿色荧光小鼠胚胎干细胞(Greenfluorescentmouseembryonicstemcells，GFP．mESCs

4、)，此组简称为GFP．mESCs治疗组；右眼于视网膜下腔注射等量DMEM／F12，此组称为RP模型组；腹腔注入等量生理盐水的小鼠视网膜下腔注射等量DMEM佰12，此组称为正常对照组。第4周末处死所有小鼠，取小鼠眼球分别行HE染色检测视网膜全层厚度和感光细胞层厚度，免疫组化染色及蛋白质印迹法检测S-Opsin及IB-Tubulin蛋白表达量。结果：1、用碘酸钠腹腔注射法成功地建立了C57BL／6小鼠双眼RP动物模型。2、从视网膜组织形态学方面看，GFP—mESCs治疗后视网膜结构仍出现视网膜损伤表现，但损伤程度较未经治疗的RP模型组轻。3、从视网

5、膜相关蛋白表达量看，GFP．mESCs治疗后S-Opsin及13-Tubulin蛋白表达量较正常对照组减少，却高于RP模型组。结论：从视网膜组织从视网膜组织形态学及视网膜相关蛋白表达量的变化方面，可以证实视网膜下腔胚胎干细胞移植治疗可以在一定程度上缓解RP的发生发展，为临床治疗RP提供帮助关键词：RP；GFP—mESCs；移植治疗；Nal03★本课题来源丁．省级科技支撑计划项目《诱导大鼠胚胎干细胞体外分化为视网膜色素上皮细胞治疗视网膜色素变性(编号：20111BBG70926．3)》。AbstractABSTRACTobjective：Reti

6、nitispigmentosa(RP)isagroupofdiseasescharacterizedbyinheritedandprogressivephotoreceptorcellsdegenerationandeventuallyleadtoretinaldegenerationandretinalatrophy,itiscurrentlyincurable．TheobjectiveofthisexperimentisexplorethetherapyofembryonicstemcellsintreatmentofRPbyestabli

7、shingamousemodelofRPusingtheintraperitonealinjectionofsodiumiodate．Methods：SelectingrandomlyfortymicefromsixtyhealthC57BL／6mice，wereestablishedamousemodelofRPusingtheintraperitonealinjectionofsodiumiodate，twentyremainingmiceinjectedequalamountsofnormalsalinesolution．After7da

8、ys，alllefteyesofRPmice．whicheyesreceivedgreenfluorescentmouseembryonicstemc