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时间:2019-03-09
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1、学校代码:lQ2题分类号:——密级:篮世UDC:§!垒:QQ曼学号:!135§3lIlllllllllllllllJiiiiirllJiiiiirlllllllllllllllY2438221隶韵大·莹川IIIIIIIIIIWF2806221④临床医学硕士学位论文纳米载体装载藤黄酸对逆转K56Z/A02细胞多药耐药性的机制研究研究生姓名:导师姓名:申请学位类别蜂鏖医堂亟±学位授予单位盔亩太堂专业名称堕鏖医掌论文答辩日期2Q!!生垒§旦2§旦研究方向奥蘧内科学位授予日期2垒】2生Q§且!§旦答辩委员会主席鳇玺生评阅人瞳丝(熬攫22013年5月20日隶劫大·粤临床医
2、学硕士学位论文纳米载体装载藤黄酸对逆转K562/A02细胞多药耐药性的机制研究专业名称:监废医堂研究生姓名:胡渲渲导师姓名:隆室.塞MechanismofNanometerCarrierLoadedwithGambogicAcidontheReversalofMultidrugResistanceinK562/A02CellsAThesisSubmittedtoSoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofMedicineBYHUQing—jieSupervisedbyProfessorCHENBno.anSc
3、hoolofMedicineSoutheastUniversityApril2013东南大学学位论文独性明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:‘鲤瞎扯日期:二型丝L止东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文
4、档,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外,允许论文被查阅和借阅,可以公布(包括以电子信息形式刊登)论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布(包括以电子信息形式刊登)授权东南大学研究生院办理。研究生签名:龇导师签名:东南大学硕士学位论文纳米载体装载藤黄酸对逆转K562/A02细胞多药耐药性的机制研究东南大学医学院中大医院血液科(江苏医学重点学科)硕士研究生:胡清洁导师:陈宝安教授中文摘要研究目的:(1)探讨藤黄酸(Gambogicacid,GA)对KS62/A02耐药细胞株的耐药逆转
5、作用及其作用机制;(2)研究携带GA的PEG.PLL-PLGA纳米载体对K562/A02细胞耐药的逆转作用,并从蛋白质水平初步探讨PEG.PLL.PLGA.GA逆转K562/A02细胞对柔红霉素耐药的机制,为临床治疗提供新策略和理论基础。方法:(1)化学合成纳米载体PEG.PLL-PLGA,并采用乳化溶剂挥发法,将溶有藤黄酸和纳米载体的有机溶剂,加入到含有乳化剂的水相中,通过机械搅拌或超声形成o/w型乳剂,除去内相有机溶剂,制得纳米载药粒;(2)溴化3.(4,5.二甲基噻唑.2).2,5.二苯基四氮唑(MTT)法检测K562/A02细胞株分别与GA,DNR,GA
6、+DNR,PEG—PLL.PLGA.GA+DNR孵育24h、36h、48h后细胞的增殖抑制率;(3)将对照组,单加GA组,单加DNR组,GA+DNR组,PEG.PLL-PLGA.GA+DNR组分别予以DAPI染色,经荧光显微镜检测各组细胞经干预后的形态学变化;(4)流式细胞仪术检测各实验组细胞的凋亡率:(5)流式细胞仪术检测各实验组细胞中DNR浓度;(6)蛋白印迹(Westernblot)法检测各实验组细胞P.gP、survivin蛋白的表达水平。结果:(1)GA可增加KS62/A02耐药细胞株对DNR的敏感性,使其生长抑制率明显增加,有效逆转KS62/A02细
7、胞对DNR的耐药。①单独DNR作用于KS62/A02耐药细胞株48h后测得DNR的IC50值为(29.52±1.47)tJPJml:②当GA浓度≤o.0625pmol/L时,对K562/A02细胞的增殖无明显抑制作用。将0.0625pmol/LGA联合不同浓度DNR作用于KS62/A02细胞48h所测得DNR的IC50值为(17.76±1.25)pg/ml,与单用DNR相比,对细胞增殖抑制的差异有统计学意义(P8、24h、36h、48h后
8、24h、36h、48h后
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