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《扁茎黄芪离体快繁及多倍体诱导》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、94-99草业学报第18卷第1期2009年2月ACTAPRATACULTURAESINICAVol.18,No.1扁茎黄芪离体快繁及多倍体诱导3王丽艳,荆瑞勇,肖莉杰,方淑梅,张红梅,王北艳,殷奎德(黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆163319)摘要:以扁茎黄芪的干燥成熟种子为外植体,研究其离体快繁技术,并在无菌繁殖条件下探索了秋水仙碱溶液不同浓度和时间处理对扁茎黄芪的诱变效应。快繁研究结果显示,扁茎黄芪的发芽培养基为MS,继代增殖最适培养基为MS+62BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均增殖系数达到4.5,平均苗高达3
2、.5cm;生根最适培养基为1/2MS+NAA0.05mg/L,生根数为4～6条,生根率达到100%。采用浸泡法将扁茎黄芪的茎尖在0.1%,0.3%和0.5%不同秋水仙碱溶液浓度下分别处理1,2,3和4d,并对诱导处理后获得的再生植株进行染色体鉴定,得出以0.3%秋水仙碱溶液浸泡3d为诱导多倍体的最佳处理组合,诱导率达40%。关键词:扁茎黄芪;离体培养;多倍体;秋水仙碱诱导中图分类号:S567.035;Q943.1文献标识码:A文章编号:100425759(2009)01200942063[1]扁茎黄芪(Astragaluscomplanatus
3、)系豆科黄芪属多年生草本植物,直根系,主根肥大呈圆柱形。植株全匍匐,茎横切面呈扁圆形,抗逆性强,具有耐旱、耐寒、耐荫、耐瘠薄、耐践踏、适应性广等特点。其干燥成熟种子沙[2]苑子具有保肝、抗炎、降血脂、降血压、抗癌、镇痛、抗衰老等药理作用;枝叶覆盖度大,根系深,是一种优良的水土保持和果园覆盖植物;青体产量高,营养丰富,适口性强,既是优良牧草又是绿肥植物,它的花期长,是很好的蜜[3]源植物。组织培养是品种保存和种性纯化、扩大栽培的有效途径,而多倍体育种则是植物品种改良的重要手段。多倍体育种利用染色体加倍的剂量效应,可增大植物的营养器官而提高其产量,
4、同时也能增强抗逆性,而且倍性变化往往能导致次生代谢产物含量的变化,是获得有效成分含量高的新品种的一种快捷方法。普通二倍体的多年生牧草特别适合于用诱导多倍体的方法改良,因牧草是以营养体为主要利用对象。再者,在自然界多年生牧草多倍[4]体存在的频率高,所以易于诱导成功。目前,有关扁茎黄芪快繁的研究还未见报道,试验拟在对扁茎黄芪进行离体快繁系统研究的基础上,采用组织培养结合化学诱导的方式获得扁茎黄芪多倍体新类型,为获得产量高、药效成分增加等明显特点的扁茎黄芪新材料奠定基础。1材料与方法1.1试验材料材料为扁茎黄芪的种子,购于河北省安国市北方药材种子经
5、销站。1.2消毒方法取种子放在灭过菌的空三角瓶中,先用0.1%的升汞溶液消毒12～15min,再用75%的酒精消毒30～60s,最后再用无菌水冲洗5或6次,备用。1.3培养基及试验设计基本培养基为MS(murashigeandskoog)、1/2MS,并依试验目的的要求添加不同浓度配比的激素,在综合考虑成本和生产实际所需之后,确定激素的种类为62BA(62Benzylaminopurine)、NAA(12naphthlceticacid)。种子发芽培养基为MS。继代增殖培养基:在MS培养基中分别附加1.0,2.0,3.0和4.0mg/L的62B
6、A和0.05,0.10,0.20和0.50mg/LNAA;采用二因素完全随机设计进行最适激素配比的筛选,共计16个处理组合,每个处理接种3株无菌3收稿日期:2008206212;改回日期:2008209216作者简介:王丽艳(19772),女,内蒙赤峰人,讲师,硕士。E2mail:laosan1@126.com3通讯作者。©1994-2009ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net第18卷第1期草业学报2009年95苗,
7、重复4次。统计增殖个数,测量苗高。生根培养基:在1/2MS培养基中分别附加0,0.01,0.05和0.10mg/LNAA,每个处理接种1株,10次重复。1.4培养条件所有培养基皆以浓度为0.7%的卡拉胶固化,含蔗糖均为3%,在高压灭菌前将pH值调至5.8,温度为(25±2)℃。光强1500～2000lx,每日光照时数12～14h。1.5四倍体诱导与检测1.5.1四倍体的诱导采用秋水仙碱浸泡法进行四倍体诱导。取无菌苗的茎尖长约1cm,在室温下用0.1%,0.3%和0.5%秋水仙碱浸泡,每个浓度分别处理1,2,3和4d,置于摇床上摇动(50r/mi
8、n)。每处理10个茎尖,重复3次,以无菌水处理4d作对照,处理后用无菌水冲洗3次,转入不含秋水仙碱的增殖培养基上继续培养,一般会先形成愈伤组织再分化成
