植物离体快繁.ppt

《植物离体快繁.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第三章植物离体快繁技术植物离体快繁又叫微繁，是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。特点：①繁殖速率高；②培养条件可以人为控制，可进行周年生产；③占地空间小；④管理方便，利于自动化控制。第一节离体快繁的一般方法第二节离体无性繁殖中存在的一些问题第三节离体无性繁殖的商业化生产的范围和应用目录第一节离体快繁的一般方法无菌培养物的建立茎芽的增殖无根苗的生根壮苗、炼苗和移栽一、无菌培养物的建立1、采样2、消毒3、接种4、培养外植体的选择原则：①外植体类型的选择，一定程度上是由所要采

2、用的茎芽繁殖方式决定的。脱除病毒得到愈伤组织增加腋芽生枝数目1、采样茎尖有营养芽的外植体叶片②外植体的生理状态对茎芽的反应能力有明显的影响选取相对较为幼嫩、生长能力较强的部位的材料生长季节>休眠季节幼嫩部分>成熟组织接种后反应较敏感，生长能力强根据外植体的特点选择适宜的消毒剂种类、浓度和消毒时间进行外植体的表面消毒。参考第一章外植体的消毒技术。在进行常规的外植体消毒之前，也可采取其他措施来保证培养材料的无菌性。从入选的植株上切取插条，放入温室中进行培养。从田间取回的材料在室内遮光水培（黄化预处理）。2、消毒进行无菌操作时有以

3、下几点需注意：接种前提前10-20min开启超净工作台，让过滤器空气吹拂工作台面和四周台壁，操作人员接种时在工作台上应用70％乙醇擦拭双手和台面，操作时视情况应再擦拭数次。接种时试管、培养瓶应，不能对着风口或自己，最好能在火焰附近打开或塞上塞子。3、接种斜拿光照温度湿度4、培养光照时间光照强度光波长短普通培养室光照时间：12-16h/d，光照强度:1000-5000lx。不同的光照强度、时间等对培养材料的分化与生长可能有影响，如诱导愈伤组织通常在黑暗条件下较好，但器官分化则需要光照，且不同光波对器官分化有密切关系，像百合在黑

4、暗条件下长小球茎，在光照条件下长叶片，红光与远红光对烟草芽苗分化有促进作用。在试管苗的生长过程中加强光照强度可使苗木生长健壮，提高移栽成活率。光照一般,植物离体培养的温度低于15℃或高于35℃，对分化和生长都不利。大多数植物最适的培养温度在23-32℃之间，一般控制在(25±2)℃条件下培养，热带园艺植物培养温度稍高。温度离体培养中环境的湿度主要指培养容器内的湿度，相对湿度常达100％，但液体培养与固体培养时湿度可能有变化，固体培养时琼脂的用量与质量对培养环境的湿度有影响。湿度1、原球茎途径2、胚状体途径3、不定芽途径4、顶

5、芽和腋芽萌发途径二、茎芽的增殖原球茎：是兰花的种子发芽过程中特有的一种形态学结构，是缩短的、成珠状、由胚性细胞组织的类似嫩茎的器官。在组培中常从茎尖或侧芽的培养中产生。1、原球茎途径利用体细胞胚状体来进行无性系的大量繁殖具有极大的潜力。其特点是：繁殖系数高成苗快结构完整不存在嵌合现象2、胚状体途径不定芽：叶腋和茎尖以外的任何其他地方所形成的芽，由愈伤组织分化出的茎芽也称为不定芽。3、不定芽途径理论上讲，植物任何部位的器官或组织都可以产生不定芽。不定芽的产生方式：A直接发生不定芽；B先形成愈伤组织；然后形成不定芽。不定芽途径的

6、特点繁殖系数较高；易形成嵌合体；再生的植株由于根和芽可能不是来自于同一个细胞，所以易形成嵌合体。发生变异的概率较高由于经过愈伤组织阶段，发生变异的概率较高，影响无性系后代的遗传稳定性，有时使园艺植物的观赏价值或商业价值丧失。扦插繁殖组培（茎段培养）4、顶芽和腋芽萌发途径一年中插条的数目极为有限，因为自然界营养生长是有季节性的。由顶芽和腋芽直接萌发形成植株的特点无性系基本上能保持原品种的特性，发生变异的概率极低，快繁主要采用这种途径。繁殖系数较其他几种繁殖方式低。此外，为脱除病毒时也采用极其幼嫩的顶芽的茎尖分生组织作为外植体进

7、行培养。基本培养基——培养基成分、培养基类型植物激素——激素调控理论光照和温度——参照原产地的气候条件5、影响茎芽增殖的因素试管内生根试管外生根三、无根苗的生根方法：把大于1cm的芽苗，接入生根培养基诱导生根。诱导条件：（1）较低的无机盐浓度常采用1/2或1/4强度的MS培养基或低无机盐的White培养基。（2）生长素加入适量的生长素（较常用的是NAA和IBA），可促进根的诱导。（3）较低的糖浓度降低糖浓度也有利于根的诱导。（4）一定的光照强度有研究表明，较强的光照能促进根的发育，并使植株变得坚忍。绝大多数植物在2-4周内即

8、可生根.1、试管内生根2、试管外生根具体方法：在插条基部用生根粉或生长素处理，移栽生根。试管内先诱导形成根源基，移栽、保湿。离体条件下形成的枝条作为微插条进行扦插生根。当试管内难于诱导生根或市场拒绝自根苗的情况下，嫁接就成了离体快繁的最后一步必然选择。3、无根苗的嫁接又叫微型嫁接或微体嫁接