百合(lilium+spp.)离体快繁及多倍体育种的研究

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1、摘要百合(Liliumspp．)离体快繁及多倍体育种研究园林植物与观赏园艺专业硕士研究生：刘亚娟指导老师：李名扬教授屈云慧副研究员要百合(Liliumspp。)是单子叶植物亚纲百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)所有种类的总称，是世界著名切花之一，广泛用于食品和医药工业。百合商品种球繁殖率低，且易受病毒侵染而退化严重，导致其产品质量呈现下降趋势，因而，应用快速繁殖技术在短时期内生产大量优质种苗成为必要途径。再者，由于倍性育种产生的多倍体植株具有植株健壮，鳞片肥厚，高产优质等特点，因此，百合的倍性育种研究具有十分重要的理论意义和经济价值。

2、本文以新铁炮百合与黄天霸百合为实验材料，针对快速繁殖体系的建立和染色体加倍进行了初步探讨，主要结果如下：。1．以新铁炮百合为实验材料，对百合离体再生体系培养条件进行了研究，结果表明最佳外植体消毒方式是洗衣粉清洗20min，自来水冲洗15min，O．1％升汞消毒20min，O．2％次氯酸钠消毒15min，无菌水冲洗3—5次为宜，可把污染率降低到33．3％，并获得66．7％的诱导率。初代诱导百合芽分化的适宜培养基为MS+1．0mg／L6．BA+O．1mgmNAA，诱导率达100％：新铁炮百合最佳继代增殖的培养基为MS+2．0mg／L6-BA+0．2mg／

3、LNAA，其增殖系数5．0，黄天霸百合适宜继代培养基为MS+1．0mg／L6-BA+0．1me／t,NAA，其增殖系数6．75。新铁炮百合与黄天霸百合最佳生根培养基为1／2MS+O．2～0．5mgmIBA，植株和根系生长良好，生根率高，移栽成活率高。2．在建立离体再生体系基础上，利用秋水仙素溶液为诱变剂，采用浸泡法和包埋法对两种百合进行多倍体诱导，结果表明：两种方法中以浸泡法处理效果较好，二甲基亚砜的混合液处理效果比单独用秋水仙素溶液处理效果好。浸泡法以0．05％的秋水仙素和2％DMSO处理36h的诱变效果最佳，变异率达到了86％。混培法以添加0．0

4、5％的秋水仙素和2％DMSO处理10d后效果最佳，变异率达到了54％。DMSO对新铁炮百合的诱导率有促进作用。诱变产生的植株经染色体鉴定，其染色体数目为2n=4x=48，属四倍体类型。四倍体百合在二倍体的适宜增殖培养基上增殖，在1／2MS+0．2~o．5mg／LIBA的生根培养基上，增殖与生根情况良好。3．对四倍体和二倍体百合植株进行了外部形态和气孔特性的比较观察，结果表明：在同一生长阶段和环境条件下，四倍体植株叶片形态充分体现了器官的巨大性。四倍体植株叶片厚度明显增大，分别是二倍体的216．7％和164．3％，它们叶长比二倍体小，分别为84．8％和

5、81．3％，它们叶形指数变小，分别为二倍体的63．6％和46．7％。四倍体植株保卫细胞内叶绿体数目明显多于二倍体，分别为二倍体的140．1％和142．6％，保卫细胞增大，长度和宽度均大于二倍体，分别为二倍体的126．9％、143．3％和158．9％、142．5％。气孔增人，长度和宽度均大丁二倍体，分别为二倍体的136．O％、124．o％和I两南大学硕士毕业论文123．7％、158．5％。而密度下降为二倍体的56．36％和69．64％。经方差分析上述各项指标均达到了极显著水平。因此，叶片厚度、叶片宽度、叶形指数、气孔密度、保卫细胞的大小和保卫细胞内叶绿

6、体数目等可作为鉴别二倍体和四倍体百合的重要指标。4．对四倍体和二倍体百合植株进行低温处理后，比较电解质外渗率和细胞膜损伤率。在相同的低温下，四倍体植株比_二倍体植株的电解质外渗率和细胞膜损伤率低，说明耐寒性和抗旱性均四倍体较强，充分体现了多倍体抗逆性增强的优势。另外，试验测定结果还发现，叶绿素含量随倍性的增加而增加，这些为指导百合的栽培生产和选育品种提供重要数据。关键词：百合快速繁殖多倍体诱导秋水仙素二甲基亚砜Studiesonrapi粤p：opa笋at!onandpolyploid‘breeQln望U上LlllHmspp．Candidate：Liu

7、均．JuanSupervisor：Prof．LiMing-yangAssociateProf．QuYun-huiABSTRACTLilyisoneofperennialbulbousflowers，whichbelongtotheLiliaceaeofLilium．Itisoneofthefamouscutfloweroftheworldandwidelyusedinfoodandpharmacyindustryaswell．Butduetothelowpropagationrateoflilybulbletanditssusceptivitytov

8、irusinvasion，theproductqualityoflilyremainsverypoor．Qu