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《地方流行性牛白血病间接gp51_elisa抗体检测试剂盒的研制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、1406中国兽医学报2009年11月第29卷第11期ChinJVetSciNov.2009Vol.29No.11地方流行性牛白血病间接gp512ELISA抗体检测试剂盒的研制12222113吴玉石,周毅,段宏安,张睿,徐晔,毕丁仁,石德时(1.华中农业大学动物医学院湖北省预防兽医学重点实验室,湖北武汉430070;2.连云港出入境检验检疫局,江苏连云港222042)摘要:利用重组牛白血病病毒gp51蛋白作为包被抗原研制了gp512ELISA诊断试剂盒。试剂盒主要成分包括抗原gp51包被96孔板、HRP标记的兔抗牛IgG和牛白血病阴性、阳性标准血清。对试剂盒进行了特异性、灵敏度、重复
2、性及保存期试验。结果表明,试剂盒特异性好,灵敏度是AGIDT的4～8倍,批间和批内的变异系数分别小于10%和15%,于-20℃保存至少能保持6个月检测结果稳定。与法国Synbiotics公司同类试剂盒进行比对试验,诊断敏感性、特异性和符合率分别为75%、96.1%和94.6%。对采集于山东济南的164份奶牛血清和进口澳大利亚奶牛的398份血清进行检测,抗体阳性率分别6.10%和4.77%。关键词:牛白血病病毒抗体;间接ELISA;诊断试剂盒;gp51中图分类号:S8521653文献标识码:A文章编号:100524545(2009)1121406205Developmentofind
3、irectgp512enzyme2linkedimmunosorbentassaykitfordetec2tingantibodyagainstbovineleukemiavirus12222113WUYu2shi,ZHOUYi,DUANHong2an,ZHANGRui,XUYe,BIDing2ren,SHIDe2shi(1.CollegeofAnimalMedicine,HuazhongAgriculturalUniversity,KeyLabofPreventiveVeteri2naryMedicineofHubeiProvince,Wuhan430070,China;2.Li
4、anyungangEntry2exitInspectionandQuarantineBureau,Lianyungang,Jiangsu222042,China)Abstract:Anenzyme2linkedimmunosobentassaytestkitwasdevelopedusingpurifiedBLVgp51proteinascoatingantigenfordetectingantibodyagainstbovineleukemiavirus.Themaincomponentsofthekitareone962wellplatecoatedbygp51protein,
5、HRPlabelledrabbitanti2bovineIgG,thestandardpositive/negativeserum.Thespeci2ficity,sensitivity,reproducibilityandkeepingtimeofthekitweretested.Thesensitivityofthekitwas428foldoftheAGIDT;thecoefficiensofvarianceamongandbetweenbatchwerelessthan10%and15%respectively;stablityforatleastsixmonthsstor
6、edat-20℃.ThekitwascomparedsidebysidewithBLVELISAkitproducedbyFranceSynbioticsCompany,theresultsshowedthatthesensitivity,specificityandcoincidencewere75%,96.1%and9416%,respectively.Thekitwasusedtotest164serafromcowsinJinancity,Shandongprovinceand398serafromAustraliaimportcows,6.10%and4.77%ofthe
7、mwerepositive,respectively.Keywords:antibodyagainstbovineleukemiavirus;indirectenzyme2linkedimmunosorbentassay;diagnostickit;gp513Correspondingauthor,E2mail:Rock@mail.hzau.edu.cn地方流行性牛白血病(Enzooticbovineleuco2准确的诊断是控制EBL流行的前提,目前用于诊断[2]si
