bFGF在MSCs联合EPCs体外培养血管样组织过程中的作用研究.pdf

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1、分类号：密级：公开学号：2015210986单位代码：10759石河子大学硕士学位论文bFGF在MSCs联合EPCs体外培养血管样组织过程中的作用研究学位申请人邢立行指导教师吴向未申请学位类别临床医学硕士专业名称外科学研究领域普外科疾病所在学院医学院中国·新疆·石河子2018年5月TheroleofbFGFintheprocessofcultivatingintovascular-liketissuebyMSCscombinedwithEPCsinvitroADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillment

2、oftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByXingLihang(SurgicalDisease)DissertationSupervisor:WuXiangweiMay,2018摘要目的：1.探讨间充质干细胞（Mesenchymalstemcells，MSCs）联合内皮祖细胞（Endothelialprogenitorcells，EPCs）能否在体外培养出血管样组织，以及两种干细胞联合应用是否优于单种细胞应用。2.探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor，bFGF)能否促进这两种干

3、细胞联合培养血管样组织的过程。方法：1.分离、培养及扩增来源于4-6周龄C57BL/6小鼠骨髓的MSCs和EPCs；2.剪裁、消毒、鼠尾胶原包埋聚乙醇酸(Polyglycolicacid，PGA)支架材料；3.实验分组：EPCs组、MSCs组、联合组（EPCs+MSCs）、bFGF组（EPCs+MSCs+bFGF）。按实验分组将各组细胞分别接种到PGA支架上，制成细胞-PGA复合物后在体外培养；4.体外培养1周时分别用光学显微镜及HE染色观察细胞与PGA的相容性；5.体外培养8周，终止培养，石蜡包埋，进行HE与免疫组织化学染色（CD34、α-SMA），病理专家对染色结果进行评分

4、；6.使用SPSS20.0分析软件分析各组之间免疫组织化学染色的差异。结果：1.体外培养1周时，大量细胞粘附在PGA支架纤维上，细胞与PGA相容性良好。2.体外培养8周时，联合组、EPCs组与bFGF组的CD34免疫组织化学染色均为阳性，MSCs组为阴性，联合组评分明显高于EPCs组，差异有统计学意义（p<0.01），联合组与bFGF组CD34染色评分无明显差异（p>0.05）。3.体外培养8周时，各分组的α-SMA免疫组织化学染色均为阴性。结论：1.MSCs联合EPCs可以在体外培养出血管样组织，并优于单种细胞的培养。2.bFGF在MSCs联合EPCs体外培养血管样组织过程中

5、没有明显的促进作用。关键词：间充质干细胞；内皮祖细胞；碱性成纤维细胞生长因子；聚乙醇酸；血管。IAbstractObjective1.Thisstudywasconductedtoexplorewhethermesenchymalstemcells(MSCs)combinedwithendothelialprogenitorcells(EPCs)cancultureintovascular-liketissuesinvitro,andwhetherthecombinationoftwostemcellsisbetterthansingle-cellapplication.2.T

6、hisstudywasconductedtoexplorewhetherbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)canpromotethecultureofvascular-liketissuebytwokindsofstemcells.Methods1.MSCsandEPCsderivedfromthebonemarrowof4-6weeksoldC57BL/6miceweresuccessivelyisolated,culturedandexpanded.2.Polyglycolicacid(PGA)wastailored,sterilizedan

7、dembeddedinrattailcollagen.3.Experimentalgroups:EPCsgroup,MSCsgroup,combinedgroup(EPCs+MSCs),bFGFgroup(EPCs+MSCs+bFGF).PlacingeachgroupofcellsonthePGAscaffoldtomakeintoacell-PGAcompound,andculturedthecompoundinvitro.4.ThecompatibilityofcellswithPGA