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1、张新海等 小鼠CD226(PTA1)的基因克隆及其异型 第6期·371··分子与细胞免疫学·①小鼠CD226(PTA1)的基因克隆及其异型张新海 李德敏 欧阳为明 贾 卫 谢 鑫 陈丽华 宁双飞 张 金伯泉(第四军医大学免疫学教研室,西安710032) 中国图书分类号 R392Q781 文献标识码 A 文章编号 10002484X(2002)0620371205摘 要 目的:克隆小鼠CD226(PTA1)分子。方法:从GenBank中检索出与人CD226分子在氨基酸水平上有51%同源性的EST序列,设计并合成特异性引物,采用快速扩增cDNA末端
2、的RACE方法,从4周龄BALBPc小鼠的胸腺中扩增小鼠CD226cDNA序列。结果:克隆出完整的小鼠CD226cDNA,长2223bp,其中开放读框为1002bp,编码含信号肽在内的333个氨基酸,属免疫球蛋白超家族分子,较人CD226分子少了3个氨基酸,在氨基酸水平上有53%的同源性。此外,还克隆了小鼠CD226分子的3种异型。结论:成功克隆出小鼠CD226(PTA1)cDNA,并发现3种异型,全面探讨该分子生物学特性,进行体内功能实验,基因敲除小鼠和转基因小鼠的研究提供了坚实的基础。关键词 CD226 血小板PT细胞活化抗原1 小鼠 基因克隆 异型
3、MolecularcloningofmouseCD226(PTA1)anditsisoformsZHANGXin2Hai,LIDe2Min,OUYANGWei2Mingetal.DepartmentofImmunology,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710032AbstractObjective:ToclonemouseCD226(plateletandTcellactivationantigen1,PTA1).Methods:Specificprimersweredesignedandsythesized
4、accordingtotheESTsequencefromGenBank,whichhad51%homologytohumanCD226ontheaminoacidlevel.Andthen,thecDNAofmouseCD226wasclonedfromthethymusof42week2oldBALBPcmousebyusingRACEtechnique.Results:ThelengthofmouseCD226cDNAis2223bp,withtheopenreadingframe(ORF)of1002bp,encoding333aminoacid
5、s,whichis3aminoacidsshorterthanitscounterpartinhuman.ThemouseCD226belongstoIgSF,andshares53%homologywithhumanPTA1onaminoacidlevel.Besides,threeiso2formsofmousePTA1werealsoclonedatthemeantime.Conclusion:ThemolecularcloningofmousePTA1laysthefoundationfortheinvivostudiesonthebiologi
6、calfunctionofthismolecule,aswellasthestudiesofthismoleculeingeneknockoutmouseandtransgenicmouse.KeywordsCD226PlateletandTcellactivationantigen1(PTA1)MouseMolecularcloningIsoform 人血小板PT细胞活化抗原1(PlateletandTcell集,并参与其中的信号转导;与血小板功能异常、自activationantigen1,PTA1),是1997年基因克隆成功身免疫性疾病、移植物抗
7、宿主反应、病毒感染性疾病1的一个新分子,并在2000年第七届国际人类白细以及肿瘤等疾病的发病机制有着密切的关系。本实胞分化抗原协作组大会上获准了新的CD编号验室已于1997年克隆成功猿和猴的CD226分子,并(CD226)。自1985年发现该分子以来,对其结构、分证实在氨基酸水平上与人CD226分子的同源性达2布、功能以及与临床的关系等做了大量的研究。结93%～95%。小鼠作为最常用的实验动物,不仅果证实,CD226分子属于免疫球蛋白超家族成员,胞为体内试验提供有用的动物模型,也是免疫分子基膜外区含有2个V样结构域;主要表达于活化T细因敲除和转基因最常用
8、的动物。我们根据在Gen2胞、NK细胞、巨核P血小板谱系及活化的血管内皮细Ban
