pdrg1在乳腺癌中的表达及其沉默对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文论文题目：里旦壁Q!在垩L避疸生的麦达拯墓沉逖答辩委员会主席：进鑫友答辩委员会成员：衄逝生周丞到万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1AbStra(；t．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5一月U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一部分PDRG1基因在乳腺癌组织中的表达及意义⋯⋯⋯⋯．．6材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，7／：口7K⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10第二部分siRNA靶向沉默PDRGl基因对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1Oo：口木⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25缩写、符号清单、术语表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30综述一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34综述二⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42万方数据温州医科大学硕士学位论文中文摘要㈣Y2㈣9i㈣

4、4㈣893㈣第一部分PDRGl基因在乳腺癌组织中的表达及意义目的检测PDRGl基因在乳腺癌、乳腺癌旁组织及乳腺纤维腺瘤组织中的表达情况，初步探讨其与乳腺癌发生、发展的关系。方法用免疫组织化学法检测50例乳腺癌、50例乳腺癌旁组织和30例乳腺纤维腺瘤组织中PDRGl的蛋白表达，并分析PDRGl蛋白表达与临床病理特征、病理指标之间的关系。结果PDRGl在乳腺癌旁组织、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织中的阳性率分别是10．O％、13．3％和70．O％，PDRGl基因在乳腺癌中的蛋白表达明显高于乳腺纤维腺瘤和乳腺癌旁组织中的表达(P<0．01)，而在乳腺纤维腺瘤组织与乳腺癌旁组织中表达相比差异没有统计学意

5、义(P>0．05)。PDRGl蛋白表达与患者年龄、TNM分期、T分期、病理分级、淋巴结转移、组织类型这些临床病理特征未见相关。tO-(P>0．05)。PDRGl蛋白表达与ER、PR、P53和Ki67表达也未见相关性(P>0．05)，而与C-erbB--2蛋白表达呈正相关(P<0．01)。结论PDRGl在人乳腺癌组织中呈高表达，和C—erbB一2蛋白表达呈正相关，PDRGl可能与乳腺癌的发生相关。关键词：PDRGl基因：乳腺癌；免疫组织化学万方数据温州医科大学硕士学位论文第二部分SiRNA靶向沉默PDRGl基因对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响目的验证siRNA干扰PDRGl基因的沉默效应，研究靶

6、向沉默PDRGl基因对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法针对人PDRGl基因mRNA序列设计并化学方法合成3对PDRGl．siRNA；通过脂质体转染试剂进行siRNA转染，优化转染条件；设定siRNA干扰组(PDRGl．siRNA)、空白对照组(仅加细胞培养液)、转染试剂对照组(不加siRNA)和siRNA阴性对照组(NC．siRNA)，利用Real．timePCR和WesternBlot分别检测PDRGl一si砌妊转染前后MCF．7细胞中PDRGl基因和蛋白表达水平，筛选出一条干扰最有效的PDRGl．siRNA序列；通过该序列干扰PDRGl基因，分别用CCK．8和流式细胞仪检测干扰前后MC

7、F．7细胞增殖和凋亡的变化。结果当siRNA与脂质体转染试剂(体积比)比例为1比1．5时其转染效率最高(83％)，Real．timePCR、WesternBlot结果显示，PDRGl．siRNA3干扰效果最好，能有效降低PDRGlmI玳A和蛋白水平。PDRGl．siRNA3干扰组与空白对照组、阴性对照组比较，MCF一7细胞增殖明显减慢(P<0．05)，细胞凋亡率无明显差异(P>O．05)。结论筛选出一对能明显干扰PDRG