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1、第l4卷第4期海南师范学院学报(自然科学版).¨№.42001年12月JOURNALOFHAINANNORMALUNIVERSm【NATURALSCIENCE】Dee.2oOl帝王蕉组织培养条件的优化黄吟,李敏华(海南师范学院生物系,海南海1:3571158)摘要:帝王蕉原产印度尼西亚群岛.本世纪五十年代从印尼引至我省万宁县,现有小面积种值.帝王蕉果型小巧美观,口感香醇,是较有发展前速的一种经井商品,目前未见其蛆培的
2、t道,竖实验其微繁的最佳条件为:1)芽诱导培养条件:MS+4rag/LBA+(0.2~0.3)mg/L糖+06%琼脂。2)增娃熊
3、代:MS+(2~3)mg/LBA+(0.02~0.05)nIg/L萜+0.6%琼麝。MS4-(1~2)mg/LNP.A+25g/L萜+0.4%活性炭4-07%晡脂。培养基的pH均为58~6.0,光照2000~2500LX,温度29℃~30℃关键词:帝王蕉;组织培养中圉分类号:O152.7文献标识码{A帝王蕉原产印度尼西亚,本世纪五十年代由华侨从印尼引进,目前仅在我国海南省万宁县兴隆华侨农场有少量种植。该蕉果实外型与粉蕉相似,只是个体较小,仅比人的拇指略大些,熟果果色金黄,因此,也有人称之为拇指蕉,金蕉,贡蕉,口感香醇甜澜,具有观赏和食用的价值。
4、该品种的蕉植株较矮小,抗风能力较好,特别适合海南东部地区的种植,具有较大的经济商品价值。目前对其未见有组织培养方面的报道,本人在一般品种香蕉组培的基础上对帝王蕉的组培条件进行优化,其实验如下:1材料和方法:1.1材料1)帝王蕉(50era以下的芽):采自海南省万宁县兴隆华侨农场。2)本实验所用试剂均为国产分析纯及生化试剂,培养基采用MS基本培养基。12方法1.2.1外植体消毒方法用自来水冲洗吸芽表面的泥土,剥离外假茎,只留下茎:假茎=2:1,面积为6erax6cm大小,按以下方法进行消毒处理⋯:方法I【2J:用洗衣粉洗5min后自来水冲洗30r
5、ain,转入无菌室,无菌水洗2遍后将外植体剥为4cmx4cm大小,用0.2%升汞浸泡20rain,其间不断搅拌,弃去升汞用无菌水洗4~5遍,用消毒刀将外植体剥为3cmx3cm大小,从外植体茎中间一分为四,接种于芽诱导培养基内。方法Ⅱ:用质量分数为250x10的clO2浸泡30min后转入无菌室,无菌水洗4遍剥至4cm×4cm大小后用015%升汞浸泡20min,其间不断搅拌,弃去升汞用无菌水洗4~5遍,用收稿日期:2OOl-Ol-20作者简介:黄吟(1963一).男.海南文昌凡.助蓑.主要从事最生轴学耐蓑学与科,gt.r-.诈。海南师范学院学报(
6、自然科学版)2001年消毒刀将外植体剥为3cm×3cm大小.从外植体茎中间一分为四,接种于芽诱导培养基内。方法Ⅲ:在无菌室内用无菌水洗两遍后将外植体剥为4cra×4cm大小.改用75%酒精洗lmin,用无菌水洗2遍.0.15%升汞20min,其闻不断搅拌,弃去升汞用无菌水洗4~5遍,用消毒刀将外植体剥为3cm×3cm大小.从外植体茎中间一分为四,接种于芽诱导培养基内。122芽诱导培养基的优化在对其它品种香蕉组培经验基础上,设计以下培养基:1)MS+6-BA(1.0,2.0,30.40,5.0.60.70.80)mg/L+0.1mg/LNAA+3
7、0g/L糖+0.6%琼脂;2)MS+3mg/LBA+NAA(0.02,0.05,0.1.0.2.0.5.1.0)mg/L+3Og/L糖+0.6%琼脂。pH均为5.8~6.0。1.23增殖继代在芽诱导培养基优化的基础上设计以下培养基:1)MS+BA(2.0.30.40)rag/L+NAA0.01mg/L+30g/L糖+0.6%琼脂;2)MS+6-BA3rng/L+N从(OO1,0.03,0.05,0.07,0.09)rng/L+30g/L糖+0.6%琼脂;oH均为58~6.O;1.2.4根的诱导根诱导的培养基设计为1)MS+NAA(1.0.20.
8、3.0,40,5.0)mg/L+30g/L糖+04%活性炭+07%琼脂;2)Ms+6-BAlrng/L+N从(1.0.2.0,30,4.0,5.0)mg/L+30g/L糖+4%活性炭+07%琼脂;3)MS大量元素减半;4.糖由3Og/L减为25g/L。以上pH均为58~6.0。1.25温度和光照以上的接种物均培养在29℃~3O℃的培养室中,光照2000-2500LX。2结果与分析2.1外植体消毒方法的优化按1.2.1的方法进行实验,结果如下衰1外檀体消毒方法的比较Tab.1Common。f虬eril_mgmn【l0dsolnmtetial从实验
9、的结果看方法I的得率相对较低,而方法Ⅱ和Ⅲ的得率较好.也即,采用二次消毒的效果比一次消毒为好,方法I和Ⅲ为常规使用的方法,方法Ⅱ在消毒剂上做了改动,使
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