cxcl12在大鼠创伤性脑损伤后所起作用的研究

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3、摘要第一部分CXCLl2增加Bcl．2／Bax的比率抑制大鼠创伤性脑损伤后皮质神经元的凋亡目的：探讨CXCLl2对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后皮质神经细胞凋亡的影响及相关机制。方法：1．采用颅脑液压损伤装置，制备大鼠创伤性脑损伤模型；2．将实验大鼠分成四组：假手术组只开颅，不制备脑损伤模型，不注射任何试剂；对照组在损伤区周围皮质注射生理盐水；CXCLl2治疗组注射CXCLl2，CXCLl2+AMD3100治疗组注射CXCLl2+AMD3100。3．伤后3天，TUNEL试剂盒检测各组神经细胞凋亡情况

4、，TUNEL／NeuN、TUNEL／GFAP荧光双标检测凋亡细胞类型，CXCR4／NeuN免疫荧光双标检测凋亡神经元CXCR4的表达情况，activecaspase-3／NeuN、activecaspase-3／GFAP、Bcl一2／NeuN、Bcl一2／GFAP、Bax／NeuN、Bax／GFAP免疫荧光双标检测各组activecaspase．3、Bcl．2、Bax的阳性细胞比例及所属细胞类型。4．WesternBlot检测各组activecaspase．3、Bcl．2、Bax蛋白表达变化。5．

5、实时PCR检测各组activecaspase．3、Bcl一2、BaxmRNA表达变化。结果：1．TBI后损伤区周围皮质出现的凋亡细胞以神经元为主，且凋亡的神经元可表达CXCR4；给予CXCLl2治疗，相较于对照组，CXCLl2下调了损伤区周围皮质神经元的凋亡指数(AI)，CXCLl2+AMD3100治疗组与CXCLl2治疗组比较AI重新升高，但仍低于对照组。2．Caspase一3免疫荧光、WesternBlot及实时PCR等结果为：CXCLl2治疗组与对照组比较，activecaspase一3表达

6、下调，CXCLl2+AMD3100治疗组与CXCLl2治疗中文摘要CXCLl2在大鼠创伤性脑损伤后所起作用的研究组比较activecaspase．3重新升高，但仍低于对照组。3．Bcl．2、Bax免疫荧光、WesternBlot及实时PCR等结果为：CXCLl2治疗组与对照组比较，Bcl．2表达上调，CXCLl2+AMD3100治疗组与CXCLl2治疗组比较Bcl一2有所下降，但仍高于对照组；CXCLl2治疗组与对照组比较，Bax表达下调，CXCLl2+AMD3100治疗组与CXCLl2治疗组比较

7、Bax有所上升，但仍低于对照组；CXCLl2治疗组与对照组比较，Bcl一2／Bax比率升高，CXCLl2+AMD3100治疗组与CXCLl2治疗组比较Bcl一2／Bax比率有所下降，但仍高于对照组。结论：大鼠创伤性脑损伤后，给予CXCLl2能抑制损伤区周围皮质神经元的凋亡，其作用机制与CXCLl2／CXCR4轴提高Bcl．2／Bax比率，进而减少caspase．3的活化有关，而activecaspase．3的减少，使得凋亡级联放大过程减轻，从而使得TBI后的神经元得以保护。第二部分CXCLl2促进

8、大鼠创伤性脑损伤后神经前体细胞增殖及迁移目的：探讨CXCLl2对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后损伤区周围脑组织的神经前体细胞增殖、迁移的影响及相关机制。方法：1．采用颅脑液压损伤装置，制备大鼠创伤性脑损伤模型；2．将实验大鼠分成四组：假手术组只开颅，不制备脑损伤模型，不注射任何试剂；对照组在损伤区周围皮质注射生理盐水；CXCLl2治疗组注射CXCLl2，CXCLl2+AMD3100治疗组注射CXCLl2+AMD3100。3．伤后7天，检测BrdU／Nestin、BLBP／Nestin