貂源肺炎克雷伯氏菌耐药性、毒力及免疫原性研究

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时间:2019-03-08

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1、分类号密级UDC单位代码兽医硕士专业学位论文貂源肺炎克雷伯氏菌耐药性、毒力及免疫原性研究Studyondrugresistance,virulenceandimmunogenicityofKlebsiellapneumoniaefromMinks研究生姓名孙晓琦指导教师张传美副教授第二导师曲志娜研究员学位种类兽医硕士2018年6月QingdaoAgricµLturalUniversityTheThesisofProfessionalMasterStudyondrugresistance,virulence

2、andimmunogenicityofKlebsiellapneumoniaefromMinksGraduatewithProfessionalMasterDegree:XiaoqiSunMentor:ProfessorChuanmeiZhanngSecondMentor:ZhinaQuTypeofProfessionalDegree:MasterofAgricµLturalExtensionAcademicfield:独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我

3、所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间:年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论

4、文的全部或部分内容。研究生签名:时间:年月日导师签名:时间:年月日摘要貂源肺炎克雷伯氏菌耐药性、毒力及免疫原性研究摘要肺炎克雷伯菌简称肺炎杆菌。肺炎克雷伯菌在自然界、人和动物中广泛存在,主要存在于机体上肠道以及呼吸道,是危害人类和动物安全的最为严重的条件致病菌之一。当动物机体的抵抗力下降时,它可以通过呼吸道感染进入肺部,导致肺大叶或小叶的融合性病变,导致肺炎,死亡率相对较高。广谱抗生素如氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素的广泛使用,细菌易产生氨基糖苷类修饰酶,广谱β-内酰胺酶和头孢菌素等,对常用药物例如氨基糖

5、苷类以及第三代头孢菌素等呈现出十分严重的多重耐药现象。由肺炎克雷伯菌引起的感染病例逐年增多,且耐药菌株的增多也导致临床抗菌药物的效果降低和病程的延长。免疫效果良好的疫苗预防控制该病的发生是当前防控水貂细菌性肺炎的有效途径。试验一:本试验对从患病水貂肺脏中分离得到疑似为肺炎克雷伯菌的10株分离菌进行了生化鉴定、PCR鉴定及血清型分型试验。生化试验和PCR鉴定结果表明,所获得的10株分离菌均为K2型肺炎克雷伯杆菌。试验二:本试验通过药敏实验研究肺炎克雷伯菌对β-内酰胺耐药基因、喹诺酮类耐药基因、氨基糖苷类耐药

6、基因和ESBL-抗生素耐药基因的携带情况进行分析,并进行相关耐药机制分析。通过研究发现,10株肺炎克雷伯菌对头孢曲松、氨苄西林、替卡西林、四环素100.0%敏感,药敏实验结果显示这十株水貂克雷伯菌对氨基糖苷类药物、β-内酰胺类药物、喹诺酮类药物、ESBL-抗生素类药物耐药性较强。同时,有4株水貂肺炎克雷伯菌的氨基糖苷类药物耐药基因、β-内酰胺类药物耐药基因和ESBL-抗生素类药物耐药基因同时存在。试验三:本试验将10株菌对小鼠进行攻毒试验,攻毒后观察14d,记录试验动物的发病及死亡情况。并研究10株肺炎克

7、雷伯的rmpA、aer-1、ybt、ureA、wabG、FimH、wcaG、alls、kfubc、uge、iucb、iroNB12种毒力基因的分布数,试图分析与毒力二者的相关性。挑选出毒力最强的菌株,采用Reed-Muench方法计算了最强菌株的半数致死量(LD50)。采用挑选出的菌株实验室制备疫苗,对小鼠进行免疫保护试验,测得实验室制备的疫苗对小鼠的保护率为100%。关键词:肺炎克雷伯氏菌;耐药基因;毒力基因;免疫原性AbstractStudyondrugresistance,virulenceandi

8、mmunogenicityofKlebsiellapneumoniaefromMinksKlebsiellapneumoniaisreferredtoasKlebsiella.Klebsiellapneumoniaeiswidelyfoundinnature,humansandanimals.Itmainlyexistsintheupperintestineandrespiratorytractofthebody.Itison

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