shkbp1对肺癌发生发展的作用及其机制研究

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级:公开UDC:___________Shkbp1对肺癌发生发展的作用及其机制研究姓名刘擎学号：2111543019院系：基础学院专业：病理学与病理生理学研究方向：肿瘤分子病理导师：李江超论文提交日期：2018年5月论文答辩日期：2018年5月学位授予单位：广东药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文TheroleofShkbp1inthedevelopmentoflungcancerandits

2、mechanismCandidate：QingLiuStudentID：2111543019Affiliation：SchoolofBasicCoursesAcademicDegreeApliedfor：MasterofMedicalSpeciality：PathologyandpathophysiologySupervisor：JiangchaoLiDayofDefence：May2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUn

3、iversityMay,2018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士学位论文Shkbp1对肺癌发生发展的作用及其机制研究中文摘要在癌症诊断和靶向治疗中，EGFR是癌基因这一观点被广泛认同。Shkbp1最近被发现，它是EGFR上游分子，可以保护EGFR免受降解。然而，在肿瘤生长过程中Shkbp1功能仍有待进一步研究。在本研究中，我们首先通过对来自TCGA数据库的494个匹配肺肿瘤组织和临近的非肿瘤组织的mRNA进行分析，发现Shkb

4、p1与临床TNM的分期呈正相关。此外，通过利用免疫组化对肺癌组织芯片（125例）进行检测分析，发现其在临床肺癌样本中高表达，并且与淋巴结转移有关。机制上，利用Shkbp1敲除小鼠通过化学药物（乌拉坦）诱导建立肺腺癌自发模型,研究Shkbp1在肿瘤发生发展中的作用，其结果显示：与对照组小鼠比较，Shkbp1基因敲除小鼠的肺部肿瘤数量和体积均显著减少。为进一步探讨其机制，利用siRNA干扰将Shkbp1在其高表达的肺癌细胞系中沉默，同样，利用腺病毒载体将Shkbp1在其低表达的细胞系中过表达，通过一系列

5、细胞功能实验表明：在肺癌细胞系中，降低Shkbp1的表达抑制了细胞的迁移和侵袭，反之亦然。此外，还通过蛋白芯片检测，结果提示沉默Shkbp1会影响EGFR信号通路。上述一系列结果表明：Shkbp1与肿瘤的迁移和侵袭密切相关。此外，除了肿瘤细胞表达Shkbp1之外，我们还发现Shkbp1蛋白在许多类型免疫细胞中高表达，因此，利用Shkbp1敲除小鼠通过皮下移植肿瘤模型和尾静脉转移模型，探讨免疫细胞缺失Shkbp1后是否会影响肿瘤的生长。结果表明，敲除Shkbp1能降低肿瘤小1广东药科大学硕士学位论文鼠

6、的肿瘤生长速度，提示免疫细胞的Shkbp1缺失亦能影响肿瘤的生长。进一步通过流式细胞术，证明Shkbp1会影响部分免疫细胞的亚型变化。综上所述，得出以下结论：（1）Shkbp1在临床肺癌标本中高表达，且表达阳性率与肺癌的TNM分期呈正相关，与淋巴结转移相关；（2）Shkbp1敲除小鼠药物诱导肺癌，肿瘤的生长受到抑制；（3）沉默Shkbp1抑制了肺癌细胞的迁移和侵袭；Shkbp1过表达促进肺癌细胞的迁移和侵袭；（4）Shkbp1影响了上皮间充质转化，其过程涉及到EGFR信号通路；（5）免疫细胞的Shk

7、bp1缺失亦可以抑制肿瘤的生长。本研究揭示了Shkbp1促癌转移的作用，为研究Shkbp1在临床诊断和靶向药物中的重要作用提供新的实验基础和理论依据。关键词：Shkbp1；肺癌；转移；EMT；EGFR2广东药科大学硕士学位论文TheRoleOfShkbp1InTheDevelopmentOfLungCancerAndItsMechanismABSTRACTEGFRwasregardedasaoncogenethatiswidelyrecognizedincancerdiagnosisandtarge

8、tedtherapy.Shkbp1wasrecentlyfoundtobeanEGFRupstreammoleculethatprotectsEGFRfromdegradation.However,thefunctionofShkbp1intumorgrowthremainstobefurtherstudied.Inthisstudy,wefirstanalyzedthemRNAof494matchinglungtumortissuesandadjacentnon-t