桑叶酸性蛋白多糖分离纯化、结构鉴定及生物学药理活性的研究

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1、硕士学位论文摘要桑叶酸性蛋白多糖的分离纯化、结构鉴定及生物学药理活性的研究摘要：本实验以桑叶(FoliumMori)为研究材料，提取、分离、纯化得到一酸性蛋白多糖，并初步研究了其理化性质和生物学药理活性。实验分为四个部分第一部分主要研究桑叶酸性蛋白多糖的提取、分离、纯化及其结构鉴定：桑叶粉碎脱脂后加水煎煮，减压浓缩提取液，醇沉，干燥得桑叶粗多糖。经D101大孔树脂，脱蛋白，脱色，DEAE．32阴离子纤维素柱及SephadexG．100葡聚糖凝胶柱层析对产物进行分离纯化，得桑叶多糖纯品。通过瓜、uV、HPLC、”C-NMR、1H．NMR、氨基酸组成测定等

2、方法分析其理化性质。实验结果显示：该多糖为桑叶酸性蛋白多糖(APFM)，分子量超过50万，且分布均一，组成单体为o．型毗哺糖，含糖醛酸和硫酸基，主要由D．鼠李糖、L一阿拉伯糖、D一果糖、D一葡萄糖、D一半乳糖组成，其摩尔比为8．91：2．71：1．00：3．75：6．04。其蛋白质部分含17种氨基酸，其中7种为人体必需氨基酸。第二部分主要研究APFM的抗氧化作用：实验结果表明APFM可以有效清除化学模拟体系中形成的HO·和-02一，抑Nd,鼠脏器在该体系和糖尿病模型中MDA的形成和积累，明显减轻I-tO·诱导的小鼠肝线粒体的肿胀和模型小鼠脏器中SOD活

3、性的降低，并都存在明显的量效关系。可以认为APFM具有良好的体外和体内的抗氧化作用，是一种有效的自由基淬灭剂。第三部分主要研究APFM对重金属铅和镉胁迫下人正常肾细胞生长抑制的缓解作用：实验发现，低浓度的APFM能促进人正常肾细胞HEK293的生长，并能显著缓解铅和镉对HEK293细胞生长的抑制作用，其中2599·ml。和5099·ml。浓度试验组的效果最明显i实验还发现，铅和镉对HEK293细胞生长的抑制作用有一个渐进的累积过程，这种胁迫作用存在浓度和时间两个因素，APFM能在一定时间和浓度范围内缓解由重金属引起的HEK293细胞生长的抑制作用，但不

4、能⋯恢复缅肛正常阿生长状态。一～一⋯⋯⋯⋯‘一一‘⋯。硕士学位论文摘要第四部分主要研究APFM对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的降糖降脂作用：实验结果显示，随着给药时间的延长，APFM能显著减轻糖尿病小鼠多饮、多食、多尿的症状，降低糖尿病小鼠的血糖值。且中剂量组的效果最佳，四周后其血糖值与正常组比无显著差异，血糖曲线下面积与模型组有显著差异(P<0．05)。APFM还能减少小鼠血清中的NO、NOS、TL、TC含量，提高血清中HDL含量。表明APFM能有效降低糖尿病小鼠的高血糖和高血脂。关键词：桑叶：酸性蛋白多糖；分离纯化；理化性质；生物学活性。II硕士学位论文

5、AbstractStudyonSeparation，Purification，CharacterizationandBiologicalactivitiesofacidproteoglycanfromFoliummoriAbstract：Inthispaper,weseparatedandpurifiedanacidproteoglycanfromFoliummori(APFM)，also，theCharacterizationandBiologicalactivitiesofthisacidproteoglycanberesearched．Theex

6、perimentincludedfourparts：Inthefirstpart，westudiedtheextraction，separation，purificationandcharacterizationofAPFM：ThepolysaccharideswasextractedfromFoliummoribyoptimizingwater,thenisolatedandpurifiedbyD101resin，DEAE—cellulosecolumnandSephadexG一100gelcolumnchromatography．IR，UV,HPL

7、C，13C-NMR，1H-NMRandAminoacidscompositionidentificationwereusedforstructuralanalysis．TheresultsshowedthatAPFMWaSapureacidproteoglycan，composedofuron／cacids，D．Rhamnose、L．Arabinose、D—Fructose、D．GlucoseandD-Galactose(themolarratio：8．91：2．71：1．00：3．75：6．04)．It’SmonomerofcomponentwasQ

8、—pyranose．Inaddition，APFMcontainedseventeenkind