雪菊糖聚物的分离纯化、结构鉴定及药理活性研究

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级：__________UDC：___________雪菊糖聚物的分离纯化、结构鉴定及药理活性研究姓名：陈威学号：2111540135院系：药学院学位类型：专业学位专业：药学研究方向：药物研发与转化导师：严春艳教授论文提交日期：2018年03月20日论文答辩日期：2018年05月23日学位授予单位：广东药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文Isolation,Purification,StructuralCharacterizationandBioactivitiesofSaccharides

2、fromCoreopsistinctoriaNuttCandidate：WeiChenStudentID：2111540135Affiliation：SchoolofPharmacyAcademicDegreeApliedfor：ProfessionaldegreeofPharmacySpeciality：PharmacySupervisor：Prof.ChunyanYanAssistantSupervisor：DayofDefence：May2018Degree-Conferring-Institution：GuangdongPharmaceuticalUniver

3、sityMay2018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文雪菊糖聚物的分离纯化、结构鉴定及药理活性研究摘要本文以雪菊(CoreopsistinctoriaNutt)糖聚物为研究对象，对其进行提取、分离纯化、结构鉴定和药理活性研究。首先采用热水和碱液对雪菊中的糖聚物进行提取，对水提液进行分级醇沉，得到三个部位的粗糖聚物P50、P70、P90，碱提取液醇沉得到粗糖聚物PB。采用苯酚-硫酸法测得四个部位糖聚物的糖含量分别为：66.60%、54.41%、80.78%、50.68%。将溶解性较好且糖含量高的50和70部位粗糖聚物进行脱蛋白、透析，然后用D

4、EAE-Cellulose52柱进行分离，再用SephacrylS-100或SephadexG-75进一步纯化，得到五个糖聚物CT50-2、CT70-1、CT70-1A、CT70-1B和CT70-3。采用高效凝胶渗透色谱法和比旋光度进行纯度验证，结果表明它们都为均一糖20聚物，且比旋光度分别是-12°、-45°、-9°、-37°、-20°。CT50-2、DCT70-1和CT70-3相对分子量经高效凝胶渗透色谱法计算分别是10012、2100Da和1247Da，CT70-1A和CT70-1B经MALDI-TOF-MS测得的分子量分别是1221Da和1318Da。经

5、单糖组成、红外光谱、甲基化/GC-MS和核磁共振图谱分析等方法得到五个糖聚物的一级结构，结果表明，CT50-2含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖5种单糖，包括→α-D-Glcp-(1→、→6)-α-D-Glcp-(1→、α-L-Araf-(1→、I广东药科大学硕士研究生学位论文→2)-α-L-Araf-(1→、→3)-α-L-Rhap-(1→、→6)-β-D-Galp(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→七种连接残基；CT70-1由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和果糖等6种单糖组成，包括→1)-α-D-Glcp、→4)-Glcp-α-D-(1

6、→、→1)-α-L-Araf、→5)-α-L-Araf-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→、→3)-α-L-Rhap-(1→、→3,6)-β-D-Manp-(1→、→3)-β-D-Manp-(1→、→,6)-β-D-Manp-(1→和→2,6)-β-D-Fruf-(1→十种连接残基；而CT70-1A、CT70-1B和CT70-3均由葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖组成，其中，CT70-1A含有α-D-Glcp-(1→、→6)α-D-Glc-(1→、→2)-α-L-Araf-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→五种连接残基

7、，CT70-1B含有α-D-Glcp-(1→、→2,3，6)-α-D-Glcp-(1→、→2)-α-L-Araf-(1→、α-L-Araf-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→六种连接残基，CT70-3含有→1)-α-D-Glcp、→4)-α-D-Glcp-(1→、→1)-α-L-Araf、→6)-β-D-Galp-(1→和→3,6)-β-D-Manp-(1→五种连接残基。扫描电镜结果表明CT70-1不规则的形状，表面分布着细小不均匀的颗粒，CT70-3为不规则碎片，圆二色谱结果表明CT70-1和CT70-3