替莫唑胺联合乙胺嘧啶对垂体腺瘤αt3-1细胞系增殖影响的研究

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1、中图分类号密级替莫唑胺联合乙胺嘧啶对垂体腺瘤QT3．1细胞系增殖影响的研究EffectsofTemozolomidecombinedwithPyrimethamineonproliferationofaT3．1cellsOrOllteration1cells-计：学位论文：30页表格：1个插图：7幅郭恺指导教师：张波教授申请学位级别：硕士学位学科(专业)：外科学培养单位：大连医科大学附属第一医院完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中

2、特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：堇匠!』塾签字日期：丝年生月孕日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制

3、手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密口。作者签名：亩《易导师签名：承{』R日期：珈廖年争月够日日期：三。U年呷月≈日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4(一)日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．实验方法及步骤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药及细胞活力分析⋯122．TMZ、PYR单药和TMZ联合PYR给药对QT3．1细胞的促凋亡作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯133．TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对QT3．1细胞周期的响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯144．TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对QT3．1细胞形态的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯155．TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对QT3．1细胞Caspase．3／7、8、9活性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯166．TMZ，PYR单药和TMZ联合PYR给药对QT3—1细胞细胞凋亡／抗凋亡相关蛋白表达的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯2l三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27四、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30大连医科大学硕士学位论文替莫唑胺联合乙胺嘧啶对垂体腺瘤QT3．1细胞系增殖影响的研究硕士生姓名：郭恺指导教师：张波教授指导小组：廉治刚教授专业名称：外科学摘要目的：观察替莫唑胺(Temozolomide，TMZ)联合乙胺嘧啶(P

7、yrimethamine，PYR)对垂体腺瘤etT3．1细胞系增殖的影响，探讨药物治疗无功能型垂体腺瘤的新方法。方法：细胞增殖抑制试验：以CCK．8法测定TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对无功能型垂体腺瘤细胞aT3．1的抑制率。细胞凋亡试验：以流式细胞检测技术测定TMZ，PYR胆药，TMZ联合PYR给药对aT3．1细胞凋亡的影响。细胞周期检测：以流式细胞检测技术测定TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对aT3—1细胞周期的影响。免疫组织化学TUNEL染色：使用共聚焦显微镜观察TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对aT3

8、．1细胞形态的影响。WesternBlot：使用WesternBlot技术检测TMZ，PYR单药，TMZ联合PYR给药对aT3．1细胞内细胞凋亡相关蛋白的表达。结果：TMZ或者PYR单药能浓度依赖地抑制QT3．1细胞增殖