伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究

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1、分类号：R9单位代码：10752密级：公开学号：2010077宁夏医科大学硕士研究生学位论文伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究StudyontherapeuticeffectoftheeffectivepartsofAconitumflavumonAdjuvantarthritisinrats学位申请人：康小兰指导教师：付雪艳副教授申请学位门类级别：医学专业名称：药理学研究方向：中药药效物质基础所在学院：药学院论文完成日期：二O一三年九月宁夏医科大学研究生院万方数据NingxiaMedicalΜniversityThesisforApplicationofMaster’

2、sDegreeStudyontherapeuticeffectoftheeffectivepartsofAconitumflavumonAdjuvantarthritisinratsStudent’sName:KangXiao-lanSupervisor：Prof.FuXue-yanSubjectCategory:MedicalScienceMajor:PharmacologyCollege:PharmacyCompletionDate:Sep.2013万方数据宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为

3、。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文

4、在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日万方数据宁夏医科大学硕士论文中文摘要伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究摘要目的探讨伏毛铁棒锤有效部位对实验性类风湿性关节炎(RA)的治疗作用及作用机制。方法1.采用溶剂法对伏毛铁棒锤进行提取，利用大孔吸附树脂、阳离子交换树脂技术对伏毛铁棒锤有效部位进行富集；采用紫外分光光度法对伏毛铁棒锤非生物碱有效部位总黄酮类成分进行含量测定。2.通过MTT比色法观测伏毛铁棒锤有效部位、有效成分对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响。3.雄性SD大鼠72只，体重180士20g，随机分为9组。除空白组外，其余各组大鼠右

5、后足垫皮内注射完全弗氏佐剂(Freund’sCompleteAdjuvant，CFA)制备大鼠佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA)模型。造模后第8天开始灌胃给药，每日一次。30%醇部位高、中、低剂量组以30%醇洗脱部位的溶液(60，30，15mg/kg)灌服；非生物碱部位高、中、低剂量组以非生物碱部位溶液(120，60，30mg/kg)灌服；阳性药对照组以雷公藤多苷片混悬液(9.45mg/kg)灌服；空白对照组、模型对照组以0.5%的CMC-Na水溶液灌服。连续灌胃给药21天，于末次给药2h后对大鼠进行相应处理。4.采用HE染色、关节肿胀度、多发性关节炎指数、体重等指标

6、对大鼠AA模型制备进行评价，并利用上述指标观察伏毛铁棒锤有效部位对AA大鼠的治疗作用。5.利用ELISA法检测AA大鼠血清中的IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-17及TNF-α的含量；免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)观察血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和基质金属蛋白酶-3(Matrixmetalloproteinases-3,MMP-3)在滑膜组织中的表达情况。结果I万方数据宁夏医科大学硕士论文中文摘要1.伏毛铁棒锤干燥块根3kg经提取后得到了粗提浸膏0.3kg，大孔吸附树脂富

7、集到了30%醇部位12.3g，得率为4.1%；取30%醇部位浸膏8g，通过阳离子交换树脂分离，得到非生物碱部位4g，得率为50%。2.伏毛铁棒锤原药材中总黄酮含量为1.2%，大孔吸附树脂30%乙醇洗脱部位中总黄酮含量为9.6%；经阳离子交换树脂分离，得到的非生物碱有效部位总黄酮含量为29.26%。3.蒙花苷(0.05，0.01mg/kg)，30%醇部位(3.12g/kg)可明显抑制ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应(p