sirt1通过lxr及nf-κb信号通路抑制泡沫细胞的形成

《sirt1通过lxr及nf-κb信号通路抑制泡沫细胞的形成》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、硕士学位论文题目SIRT1通过LXR及NF-κB信号通路抑制泡沫细胞的形成SIRT1preventsatherosclerosisthroughbothliver-X-receptor英文题目(LXR)andNF-κBsignalings姓名曾海涛学号11020079所在学院医学院导师姓名王伟教授专业内科学入学日期2010年9月答辩日期2013年6月学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。

2、对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文；学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文，按照保密的有关规定和程序处理。作者签名：导师签名：日期：年月日日期：年月日汕头大学医学

3、院硕士学位论文中文摘要目的：建立U937泡沫细胞模型，对比观察能量限制（CR）和高脂加氧化型低密度脂蛋白诱导对人单核细胞内脂肪积累和SIRT1基因表达的影响；探讨SIRT1信号通路是否参与泡沫细胞形成的调节机制及是否通过调节LXR和NF-κB抑制泡沫细胞的形成。方法：用含有不同浓度软脂酸钠的培养基培养单核细胞，并利用四氮唑蓝检测法（3-(4,5-dimetrylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT）确定一个对于细胞损伤较小且效果最好的药物作用浓度。分别

4、利用低糖（能量限制组、CR组）、高糖（对照组）、高脂（软脂酸钠组）、高脂加氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）不同培养基培养单核细胞，油红O对细胞进行脂肪染色，定性定量检测细胞内脂肪积累情况。然后在同样模型的基础上，分别提取细胞内mRNA和蛋白质，进行逆转录PCR和Westernblot检测，观察不同组间SIRT1、LXR和NF-κB基因和蛋白的表达情况。最后在高脂加低密度脂蛋白模型中加入SIRT1激动剂SRT1720及SIRT1抑制剂尼克酰胺，在基因和蛋白水平观察LXR及其下游靶分子ABCA1,ABCG1,CCR

5、7和NF-κB及其下游靶分子TNFα,IL-1β的表达情况。结果：MTT的检测结果显示，2.0mM的软脂酸钠是一个合适的药物作用浓度。观察细胞内脂肪积累的试验结果显示，高糖诱导所产生的细胞内脂肪积累没有显著性变化，CR组的细胞内脂肪积累显著少于其他三组，高脂诱导下的细胞内脂肪积累显著高于其他三组。RT-PCR和Westernblot的试验检测结果表明，与高糖培养和高脂培养情况下不同的是，CR情况下，SIRT1、LXRa及其靶分子的表达增加，而NF-κB及其靶分子的表达降低。与高糖培养情况下相比，高脂培养可以促使

6、SIRT1及LXRa及其靶分子ABCA1,ABCG1,CCR7的表达降低，可使NF-κB及其靶分子TNFα,IL-1β的表达增加。在高脂加低密度脂蛋白培养情况下，SRT1720作用可以促使SIRT1、LXRa及其靶分子ABCA1,ABCG1,CCR7的表达增加，但NF-κB及其靶分子TNFα,IL-1β的表达降低，同时细胞的泡沫化进程被阻止。SIRT1的抑制剂尼克酰胺可以抵消SRT1720的上述作用。结论：在高脂尤其是高脂加氧化型低密度脂蛋白培养条件下，人单核细胞内积累了大量的脂肪，在单核细胞泡沫化的进程中，S

7、IRT1基因的表达发生了显著变化，LXR及其下游靶I汕头大学医学院硕士学位论文分子ABCA1,ABCG1,CCR7随着SIRT1表达的增强而增强，而NF-κB及其下游靶分子TNFα,IL-1β随着SIRT1表达的增强而减弱。我们的实验证实了在泡沫细胞的形成过程中SIRT1信号被抑制，并且SIRT1可能通过激活LXR-ABCA1/ABCG1/CCR7信号通路和抑制NF-κB信号通路阻止单核细胞向泡沫细胞发展。能量限制条件下，该通路至少是能量限制阻止单核细胞向泡沫细胞发展的重要原因之一。为探究长寿基因SIRT1在动

8、脉粥样硬化形成过程中调控机制提出了一个新的思路，为该病的防治提供了更理想的干预途径。关键词：动脉粥样硬化；SIRT1；LXR；NF-κB；泡沫细胞。II汕头大学医学院硕士学位论文ABSTRACTObjective:TheaimofthisstudyweretobuildU937foamcellsmodel，tocomparativeobservefataccumulationinhum