金福菇多糖tlh-3抗衰老作用及其机制的初步研究

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1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成鬃。据我所知，除了文中特别加以标注和致澍的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究乒斤傲的任何贡献均已在论文中{乍了明确的谎明并表示谢意。学墩坡作者签名：浆南签字目期：yi争年pf月刁日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全7解安徽大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁

2、盘。允许论文被查阅和借阅。本入授投安徽大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据摩进：i亏检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：浆篱导师签名：签字日期：wi争年妙∥月四日'簿钐替㈣弘舻幻7曰中文摘要㈣删一阐明，衰老过程中的退行性变化是由于机体代谢产生的自由基的氧化作用引起的，降低其氧化作用，就会在一定程度上减少自由基对机体的损害。因此，寻找一种通过抗氧化达到清除自由基目的的天然药物成为抗衰老药研究热点。金福菇是一种优

3、质食用菌，前景广阔。本实验室前期研究发现，金福菇多糖TLH．3组分能有效的清除氧自由基和抑制红细胞溶血及丙二醛的产生，并具有较高的抗氧化活性，其清除超氧阴离子的IC50为126gg／mL，与Vc在同一数量级水平(111I_tg／mL)。因此，金福菇多糖TLH．3是否也具有相当的抗衰老活性有待进一步研究。本实验通过建立细胞和动物衰老模型，探究金福菇多糖TLH一3对细胞周期及衰老相关蛋白的表达等方面的影响，从细胞及动物水平研究金福菇多糖TLH．3的抗衰老作用和机制，为人类的延年益寿提供科学的依据，为开

4、发多糖类药物提供(1)检测金福菇多糖TLH．3对t-BHP诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)33342／PI双染法观察保护作用，AnnexinV-FITC／PI流式细胞术分析TLH．3对处理组的细胞存活率较高，而且随着TLH．3浓度的增大，细胞存活率升高；与长状况有所改善且与剂量呈正相关，说明TLH．3对细胞具有一定的保护作用。(2)探讨金福菇多糖TLH．3对HELF细胞衰老模型的作用。首先用t-BHP进行过氧化诱导建立细胞衰老模型，同时用不同浓度多糖进行干预，检测各组细胞周期及p21蛋白表达。与

5、模型组相比，金福菇多糖TLH．3可以缓解t-BHP引预，检测其皮肤羟脯氨酸含量，血清、心脏SOD活力、MDA含量，HE染色观察小鼠病理学变化，免疫组化法分析p21蛋白表达情况。结果显示，与模型组小鼠相比，TLH处理组小鼠的皮肤羟脯氨酸含量有所增加；免疫组化检测分析显示，衰老相关蛋白p21在各组小鼠的表达量差异不明显；但多糖TLH处理组小鼠体内的SOD活力明显升高，MDA含量下降。关键词：金福菇多糖；抗衰老；细胞凋亡；衰老模型；细胞周期IIAbstractSenescenceisauniversal

6、phenomenon，andanti—senescenceisapopularprojectinscientificresearch．Accordingtothefreeradicaltheoryforaging，degenerativechangeintheagingprocessismainlycausedbytheharmfuleffectsoffreeradicalsfromcellmetabolism．Accordingly,antioxidantisthefirststeptoprev

7、entthefreeradicaldamage．Therefore，findinganaturalantioxidantmedicinetoachieveanti．senescenceeffectbyscavengingfreeradicalshasbecomehot．TricholomalobayenseHeimisakindofpreciousediblefungusindevelopment．Basedonthepreviouswork，wefoundthatthepolysaccharid

8、efraction(TLH一3)extractedfromTricholomalobayenseownedstrongscavengingabilityonfreeradicalswithIC50valuessimilartoVc，whichsignificantlyinhibitederythrocytehemolysisandMDAinvivo．Therefore，whetherthepolysaccharideTLH一3possessedconsiderableanti-se