融合基因ppsh的发现及其影响肝癌分子机制的初探

《融合基因ppsh的发现及其影响肝癌分子机制的初探》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第二军医大学硕士学位论文融合基因ppsh的发现及其影响肝癌分子机制的初探TheIdentificationandFunctionalExplorationofFusionGeneppshinHepatocellularCarcinoma研究生姓名：刘高米洋指导教师：王红阳教授学科、专业：肿瘤学培养单位：第二军医大学第三附属医院二O一四年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表

2、示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名：矗＼毒芥i、日期朋丫耖月哆日学位论文版权使用授权声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文全文或部分内容编入《中国学位论文全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》等数据库进行检索。可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：弓一1云家i、导师签名：日期一tiff41月哆日日期冲仰钳月¨日目录摘要

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．1-Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3．．英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一5．引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一6一材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一9一一、材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9．二、主要仪器和设备

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．16一三、组织标本⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．17一四、研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一17．实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．33．一、融合基因PPSH的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一33一二、构建融合基因PPSH稳定表达细胞系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一34．三、融合基因PPSH促进肝癌细胞转移和侵袭⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一35一四、融合基因PPSH对肝癌细胞的增殖能力的影响⋯⋯⋯⋯⋯一36一五、融合基因ppsh通过激活p38信号通路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．38．六、

5、PPSH促进肝癌细胞转移侵袭能力依赖于p38激活⋯⋯⋯一40一七、酵母双杂交实验发现ppsh相互作用蛋白：PSMBl和Hsp90aal⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．一41一八、双分子荧光互补实验(BiFC)证明ppsh分别和PSMBl，Hsp90aal相互作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一43一九、免疫沉淀(P)实验进一步确认ppsh靶蛋白⋯⋯⋯⋯⋯．．45。十、Hsp90a和PSMBl均能够在EGF刺激条件下与phospho—p38MAPK相互作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．45

6、一讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．一47一参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．52一附录一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．55一HSP90在原发性肝癌中的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．一55一附录二⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯∥74．在读期间发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．一74一致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．一75．融合基因ppsh的发现及其影响肝癌分子机制的初探研究背景和目的摘要原发性肝

7、癌(Primarylivercancer，PLC)是世界第八大癌症，全球每年新发生肝癌约为100万例，并且每年会造成约50万人死亡口1。作为世界上最常见的癌症之一，肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma，HCC)约占成年人原发性肝癌的80—90％。在美国，肝细胞癌患者的五年生存率只有8．9％口3，流行病学调查揭示了许多原发性肝癌相关因素，比如乙型肝炎和丙型肝炎病毒感染，过度饮酒，食用含有黄曲霉素B1的食物等呤1，其中约50％的肝癌由乙肝病毒感染引起n1；在过去的几十年里，在驱动肝癌发生的分子机制方面有很多进展，许多基因都被发现与肿瘤的发生发

8、展有重要关系，例如抑癌基因(TP53，p16和p21