银翘柴桂颗粒对流感病毒fm1感染小鼠肺损伤的实验研究

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1、广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名邂日期：加／争年岁月／乡日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库

2、进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名姿查亟论文导师签日期：汐晔年‘、、1汐中文摘要目的：1．通过观察银翘柴桂颗粒体外抗甲I型流感病毒PR-8株、FMl株及甲III型流感病毒的作用，筛选出有效作用毒株，为进一步的体内实验提供参考。2．考察银翘柴桂颗粒体内对流感病毒FMl感染小鼠的死亡保护作用。3．以肺湿干重比、肺组织病理变化及肺泡灌洗液中蛋白含量为指标，研究银翘柴桂颗粒对流感模型小鼠肺损伤的保护作用。4．检测银翘柴桂颗粒对流感病毒FMl感染小鼠肺泡灌洗液中细胞因子IL-6、TNF—Q含量的影响，探讨银翘柴桂颗粒

3、的抗炎作用。5．比较流感病毒FMl感染小鼠肺组织内超氧化物歧化(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化，研究银翘柴桂颗粒的抗氧化作用。6．通过观察流感病毒FMl感染小鼠脾指数、胸腺指数和T细胞亚群比率的变化，探讨银翘柴桂颗粒对流感病毒FMl感染小鼠免疫功能的影响。方法t1．细胞培养法测定抗病毒效果。以血凝法和MTT法共同评价银翘柴桂颗粒体外抗甲型流感病毒作用。2．流感病毒FMl滴鼻感染NIH小鼠，观察小鼠发病情况及死亡数。3．分别称量小鼠肺组织湿重与干重，计算肺湿干重比；以HE染色(苏木素一伊红染色)法观察肺组织病理变化；用考马斯亮蓝法测定肺泡灌洗液中总蛋白含且里04．采用酶联

4、免疫吸附试验(ELISA)分别测定小鼠肺泡灌洗液中IL一6、TNF-Q的含量。5．运用超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒分别检测SOD活性变化及MDA含量变化。6．检测流感病毒FMl感染小鼠免疫指数、使用流式细胞技术测定T淋巴细胞CD4+／CD8+比值。结果：1．体外实验中，血凝实验结果显示，银翘柴桂颗粒在MDCK细胞上对甲ⅡI型流感病毒无抑制作用；在浓度为2．5mg／ml时对PR一8流感病毒的抑制率为10096；在最大无毒浓度0．625mg／ml时，对FMl有57．43％的抑制率。MTT结果显示，银翘柴桂颗粒对甲III、PR一8及FMl的治疗指数分别

5、是：TI

6、显著性差异(P(O．01)。与模型组相比，银翘柴桂颗粒各剂量组均可显著性降低流感病毒感染小鼠肺泡灌洗液中IL一6和TNF-a的含量(P(O．01)。5．正常组小鼠肺组织匀浆中的SOD活性和MDA含量无明显变化。模型组小鼠肺组织匀浆中的SOD活性降低、MDA含量升高，与正常组相比有显著性差异(P

7、CD8+比值(P