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《毒热平注射液对流感病毒fm1感染小鼠免疫功能的影响论文》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响论文.freelRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用1感染模型组的肺指数明显高于正常组(P<0.001),利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低(P<0.001或P<0.01),其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组(P<0.001);毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γ
2、mRNA基因转录(P<0.001),.freelRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。【关键词】毒热平注射液;流感病毒FM1;白细胞介素4;干扰素-γ;CD40L;小鼠Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofDurepinginjection(DRP)onIL-4,IFN-γmRNAandCD40LproteinexpressionofFM1infectedmiceonia,andexplorethemechanismofantiviral
3、effect.MethodsICRmiceandmodelgroup.ThemiceRNAandIL-10mRNAinthelungtissueeasuredeasurediceinmodelgroupgroup(P<0.001).paredodelgroup,thelungindexofmiceinRibarivin,SHL,DRP1,DRP2andDRP3groupsodelgroup,DRPshoicelung(P<0.001),andup-regulationonthetranscriptionofINF-γinFM1infectedm
4、icelung(P<0.001).TheexpressionofCD40LproteininRibarivin,SHL,DRP1,DRP2andDRP3odelgroup(P<0.001),buttheexpressionofCD40LproteininDRP2,DRP3groupsgroupandRibarivingroup(P>0.05).ConclusionDRPinvivocoulddoRNA,enhancethetranscriptionofIFN-γandinhibittheexpressionofCD40Lproteininlun
5、gofFM1infectedmice.Keyice中医药在治疗流感方面具有独特的优势,临床疗效肯定。本实验主要探讨毒热平注射液对流感病毒亚甲型属肺适应株(FM1)感染小鼠肺指数,肺脏白细胞介素4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平,以及CD40L蛋白表达水平的影响,以探讨中医药抗病毒的作用机制,为临床应用提供理论依据。1实验材料1.1动物ICR小鼠(SPF级),雄性,体重18~20g,北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物合格证号:SLXKC(京)2005~2006。1.2病毒中国中医科学院中药所提供,-76℃保存备用。与9日
6、龄鸡胚尿囊腔连续传代2次后,测血凝滴度为2~12,病毒对细胞TCID50为10~3.5/100μL。1.3药物毒热平注射液,棕色液体,原药材17.4μg/mL,10mL/瓶,广东省康美药业有限公司提供。双黄连(冻干粉)注射剂,600mg/瓶,哈药集团中药二厂产品,国药准字:Z10960058,生产日期:2006-5-26。利巴韦林注射液,0.1g/mL,1mL/支,10支/盒,批号0506251,石药集团欧意药业有限公司产品。1.4试剂1.4.1PCR试剂焦碳酸二乙酯(DEPC)、硼酸、Tris碱、乙二胺四乙酸(EDTA)、琼脂糖、总RNA提取
7、试剂盒、一步法PCR反转录试剂盒TaKaRaRNAPCRKit(AMV)Ver.3.0,均购自上海生物化学试剂公司;无水乙醇为分析醇,天津市化学试剂三厂生产,用自制三蒸水配制为所需浓度;电泳加样缓冲液:二甲苯青0.25%,溴酚蓝0.25%,甘油水溶液30%;Tris-乙酸电泳缓冲液:50×:Tris-碱242g,冰乙酸57.1mL,EDTA(pH8.0)100mL;1×:Tris-乙酸0.04mol/L,EDTA(pH8.0)0.001mol/L;pH8.0TE:Tris.HCl20mmol/L,EDTA1mmol/L;引物:由北京博惠嘉业科技
8、有限公司合成。GAPDH:上游引物5’-CGTATCGGACGCCTGGTT-3’,下游引物5’-CGTGGGTAGAGTCATACTGGAA-3’(