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《cd137单抗联合il-15体外扩增nk细胞及其对肺癌细胞的杀伤活性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、硕士学位论文论文题目CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞及其对肺癌细胞的杀伤活性研究生姓名陶家龙指导教师姓名沈丽琴专业名称肿瘤学研究方向肿瘤基础与临床论文提交日期2013年3月CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞及其对肺癌细胞的杀伤活性中文摘要CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞及其对肺癌细胞的杀伤活性中文摘要目的：建立CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞的方案，研究扩增后NK细胞对肺癌细胞的杀伤活性。方法：分离健康人外周血单个核细胞，经免疫磁珠（miniMACS）阴性分选获取CD3-CD56+NK细胞，将NK细
2、胞分成对照组、IL-2+CD137单抗联合IL-15组、IL-2+CD137单抗组、IL-2+IL-15组、IL-2组进行培养，每3d半量更换条件培养基。经锥虫蓝染色法计算NK细胞的扩增倍数；流式细胞术检测NK细胞的表型；LDH酶释放法检测NK细胞对肺癌细胞株A549的杀伤活性；ELISA法检测扩增后NK细胞培养液上清中IFN-γ的分泌量。结果：经免疫磁珠阴性分选后NK细胞纯度为（93.28±3.21）%。IL-2+CD137单抗联合IL-15组NK细胞扩增倍数明显高于IL-2+CD137单抗组、IL-2+IL-15组、IL-2组及对照组[(8
3、6.20±5.00vs60.01±5.00、49.06±4.39、17.04±1.49、3.95+0.23，P<0.01)]。IL-2+CD137单抗联合IL-15组的对A549细胞的杀伤效率明显高于其它组[(93.14±3.27)%、(83.15±4.03)%、(71.25±3.24)%、(62.27±3.01)%、(49.38±2.35)%。P<0.01]。IL-2+CD137单抗联合IL-15组培养液上清中的IFN-γ的分泌水平明显高于IL-2+CD137单抗组、IL-2+IL-15组、IL-2组及对照组[(296.25±9.79)pg/
4、mlvs(260.47±11.55)pg/ml、(201.13±6.36)pg/ml、(138.36±6.09)pg/ml、(38.42±3.56)pg/ml，P<0.01]。结论：CD137单抗联合IL-15能高效扩增NK细胞，扩增后的NK细胞高效杀伤A549肺癌细胞。关键词：NK细胞、CD137单抗、IL-15、IFN-γ、肺癌细胞作者：陶家龙指导教师：沈丽琴I中文摘要CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞及其对肺癌细胞的杀伤活性基金来源：苏州市科技项目（No.51030）IICD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞及其对肺癌细胞
5、的杀伤活性英文摘要InvitroexpansionofNKcellsbycombinationofCD137monoclonalantibodyandIL-15andtheircytotoxicityagainstlungcancercellsAbstractObjective:ToexploreaninvitroexpansionmethodofNKcellsbyCD137monoclonalantibodycombinationwithIL-15.Methods:CD3-CD56+NKcellswereisolatedfromperiphe
6、ralbloodmononuclearcells(PBMC)usingnegativeMACS,anddividedintofivegroups:acontrolgroup,IL-2,IL-2+IL-15,IL-2+CD137mAb,IL-2+IL-15+CD137mAbgroups.Theexpansion,phenotypeandcytotocityoflungcancerA549cellsandIFN-γserectionofNKcellswereevaluatedbyMTT,FACS,LDH,andELLSA,respectively.
7、Results:ThepurityofNKcellsincreasedto(93.28+3.21)%afterMACSsorting.IngroupIL-2+IL-15+CD137mAb,theNKcellswereexpandedobviouslyhigherthanwerethoseIL-2+CD137mAb,IL-2+IL-15,IL-2,controlgroups(86.20+5.00vs60.01+5.00,49.06+4.39,17.04+1.49,3.95+0.23foldP<0.01).Thecytotoxicityofexpa
8、ndedNKcellsingroupIL-2+IL-15+CD137mAbwassignificantlyhigherthanthatintheoth
