线粒体trnaleu(uur)3253tc突变与原发性高血压的相关性功能研究

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1、万方数据论文题目：线趋佳tRNALen(UUR)3253T>C塞变皇厦发丝直直答辩委员会主席：鲑江塾援答辩委员会成员：自董丕数援题连垡麴拯万方数据目录lllllLIIIIIIllIIIIILIIIIIIIIIILUIfillIIllY319836中英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1第一部分引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7第二部分材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．2DNA分子实验方法⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．142．3细胞实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20第三部分结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．373．1家系分析和临床评估⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．373．2线粒体DNA全序分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯383．3血小板融合细胞系构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．413．4单克隆细胞相对拷贝数测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．413．5PCR-I心LP鉴定单克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯423．6突变组细胞ATP产量下降⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯423．7突变组细胞ROS水平上升⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯433．8突变组细胞线粒体膜电位降低⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．433．9突变组细胞tRNA水平降低⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．443．10突变组细胞tRNAku(UUR’氨酰化水平降低⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．453．11突变组细胞蛋白质合成量下降⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯463．12突变组细胞线粒体氧化呼吸链复合体酶活性下降⋯⋯⋯⋯48第四部分分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．49附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．56致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．70万方数据温州医科大学硕士学位论文AA1aAPSARCATPAdeniIleAlanineAmmoniumpersulfateAcrylamide中英文缩写AdenosineTriphosphateATPase6ATPs)，nm硒eFOsubunit6BPBl

5、oodpressurebpCBasepairCytosineCIConservationIndexCOXICyACytbDBDCFH—DADEPCDIGDMSODNAdNTPEBECGEHETCFBSCytochromecoxidasesubunitICyclosporineACytochromebDecylubiquinoneDichlorodihydrofluoresceindiacetateDiethypyrocarbonateDigoxigeninDimethylsulphoxideDeoxyfi

6、bonucleicaciddATP，dGTP，dCTPand佃mixerEmidiumBromideElectrocardiogramEssentialHypertentionElectrontransportchainFetalBovineSerum腺嘌呤核苷丙氨酸过硫酸铵丙烯酰胺三磷酸腺苷ATP合酶FO亚单位6血压碱基对胞嘧啶核苷保守性指数细胞色素C氧化酶亚单位ICyACyclosporineA环孢霉素A细胞色素b癸基泛醌双氯荧光素焦碳酸二乙酯地高辛二甲基亚砜脱氧核糖核酸寡核苷酸混合物溴化乙锭心电图原

7、发性高血压电子传递链胎牛血清CCCPcarb。nylcy锄ide4-(仃inu。‘。mem。xy)碳酰氰4．三氟甲氧基苯腙恹鱿胃kq‘二飘甲私荃今师phenylhvdrazone：：：———————————————————————。’’———————————————一万方数据温州医科大学硕士学位论文2万方数据温州医科大学硕士学位论文线粒体tRNAm(UUR’3253T>C突变与原发性高血压的相关性功能研究中文摘要近年来，随着我国居民生活方式和生态环境的改变及老龄化进程的加速，高血压和脑卒中等心血管疾病已经

8、成为我国突出的公共卫生问题。据估算，目前全国高血压患病人数约达2．7亿，严重危害国民健康。高血压是一种常见的慢性疾病，是一种由基因和环境等多种因素共同调控的疾病，而线粒体基因突变己报道与原发性高血压相关。本课题通过对中国人群原发性高血压患者进行临床资料及基因组测序筛查，以线粒体tRNA基因突变作为切入点，发现一个高外显率的原发性高血压家系携带tRNA胁(uuR’3253T>C突变，并通过生化功能实验研究其对细胞功能的影响，探讨