恶性胸水树突状细胞获取及其体外抗癌作用地研究

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1、华北煤炭医学院硕士学位论文恶性胸水树突状细胞的获取及其体外抗癌作用的研究姓名：黄艳申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：刘信荣;王红阳20030501华北煤炭医学院硕士学位论文恶性胸水树突状细胞的获取及其体外抗癌作用的研究中文摘要目的探讨恶性胸水树突状细胞的获取方法研究树突状细胞联合肿瘤浸润T淋巴细胞的体外抗癌作用初步探讨树突状细胞治疗恶性胸水的可行性为其临床应用提供实验依据方法选取2002年3月-2003年3月我院呼吸内科诊治的12名有明确病理诊断的恶性胸水患者1.密度梯度离心法获取胸水单个核细胞PEMCsHE染色法分析细胞成分2.活化胸水肿瘤浸润树突状

2、细胞TIDC和肿瘤浸润T淋巴细胞天TILPEMCs经过两步贴壁获取非贴壁的TIDC和TIL以小剂量IL-2活化143.诱导胸水单核细胞分化DCPEMCs经过两步贴壁获取先贴壁的单核细胞以GM-CSF与IL-4联合诱导14天4.细胞鉴定S-100蛋白染色法和流式细胞仪分析鉴定TIDC和DCSP法和流式细胞仪分析鉴定TIL5.体外抗癌作用GLC-82肺癌细胞系TCA分别致敏TIDCTIL和DCTIDC活化TIL生成细胞毒性T淋巴细胞CTLDC与CTL混合培养24小时CTL和混合细胞分别作为效应细胞杀伤GLC-82细胞MTT法分别检测CTL及混合细胞在

3、不同的效靶比对GLC-82细胞的特异性杀伤活性结果1.12例患者PEMCsHE染色发现三种主要细胞成分红细胞癌细胞和淋巴细胞以淋巴细胞为主要细胞成分的病例多见2.恶性胸水TIDC数量少功能低下PEMCs培养前S100+DCCD1a+DC和CD83+DC的比例分别为1.27０．６５%0.13%和03.ＩＬ－２可以激活TIDC活化TIDC14天S100+DCCD1a+DC和CD83+DC的比例分别为(1.42０．８３）%0.76%0.72%CD83+是DC的成熟标记４．　ＩＬ－２可以激活ＴＩＬ活化TIL14天CD8+阳性率明显增加T细胞免疫功能增强

4、５．GM-CSF联合IL-4获得少量不成熟DC诱导单核细胞14天S100+DCCD1a+DC和CD83+DC的比例分别为(2.12０．９１）%2.36%和06.效靶比相同CTL和混合细胞杀伤活性的差别无显著性(P0.05)效靶比不同同一效应细胞杀伤活性的差别有显著性(P0.05)　结论1.淋巴细胞是恶性胸水免疫治疗的细胞基础PEMCs以淋巴细胞为主要细胞的病例常见因此TIL自体回输治疗恶性胸水的临床应用切实可行42.恶性胸华北煤炭医学院硕士学位论文个人简历黄艳女27岁中共党员辽宁省阜新人1992∼19951995∼20002000∼2003辽

5、宁省阜新市第一高中华北煤炭医学院临床医学系华北煤炭医学院附属医院呼吸内科50高中本科硕士研究生