急性应激对大鼠脑中脱落酸变化的影响

《急性应激对大鼠脑中脱落酸变化的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国科学技术大学硕士学位论文急性应激对大鼠脑中脱落酸变化的影响姓名：张智申请学位级别：硕士专业：神经生物学指导教师：周江宁201110摘要脱落酸(AbscisicAcid，ABA)是植物中广泛存在的一种调节激素，它在植物种子休眠、幼苗生长发育、多种生物(如病原菌)和非生物(干旱、寒冷和高盐等)应激过程中都起到重要调控作用。近年来，越来越多的研究发现许多动物中也存在ABA，包括海绵、水螅、人寄生虫和多种哺乳动物组织和细胞，并参与相应的应激反应、组织生长、炎症调节、糖代谢等信号调节通路中。ABA在这些通路中的信号作用方式与植物类似，首先

2、ABA与细胞膜上的特异性蛋白结合，激活ADP核糖环化酶，从而提升胞内cADPR的表达，增加胞内Ca2+浓度，并进一步激活一系列下游信号反应。这些发现表明ABA可能作为一个普遍的信号分子，广泛参与调节植物和动物对环境的应激反应。本实验建立了动物脑组织中ABA的提取和检测方法，研究了大鼠不同脑区ABA含量的特异性分布。结果发现，ABA在前额叶、左右海马和下丘脑不同脑区的含量不同，其中以下丘脑中含量最高，为18．14-1．9n【g／g组织鲜重。实验进一步以强迫游泳和束缚两种急性应激方式，研究了大鼠大脑中ABA含量随应激的变化。结果表明，在

3、前额叶和海马中，急性束缚1小时后ABA含量约增加到对照组2倍水平，而下丘脑ABA含量却明显下降。另外，不同应激条件下，下丘脑内ABA的变化趋势与前额叶和海马相反。急性应激下，大鼠血浆皮质酮水平、下丘脑CRF和c．fos的基因表达上调。相关性分析显示，c．fos的表达变化与皮质酮的水平变化呈正相关，与下丘脑ABA水平变化呈负相关。这些结果显示，大鼠大脑中存在ABA，下丘脑可能是ABA的分泌或作用中心，而且ABA信号在下丘脑与其他脑区的可能作用方式或时间尺度存在差异。生物信息学手段对ABA植物中重要信号蛋白ABll、ABl3和ABRE／

4、ABF的比对检索发现，人源蛋白PPMlB、RNC3和ATF6与上述分子具有高度相似的氨基酸序列，相似度分别为49％，39％，60％。对筛选出的假定人ABA相关蛋白的mRNA表达研究显示，24小时20uMABA培养神经元母细胞瘤细胞系BE(2)．C能显著降低以上蛋白的表达。我们推测这些候选蛋白和ABA的信号通路存在某种直接或间接的交叉关联。为探索ABA在组织和细胞中的定位情况，进行了ABA免疫组织化学和细胞免疫荧光实验。巨噬细胞ABA免疫荧光染色结果显示，ABA主要定位于细胞膜和胞浆，无特异性胞核着色。这与前述细胞内ABA的作用方式和

5、早期玉米中ABA免疫组化结果吻合。摘要关键词：脱落酸强追游泳急性束缚应激促’肾上腺皮质激素释放因子免疫组化IIAbs仃actABSTRACTAbscisicAcid(ABA)isanimportantuniversalphytohormonewhichregulatesplantsseedsdormancy,developmentofseedlingandresponsetostressesincludingpathogens，drought，coldandsal妙Itwasdiscoveredrecentlythatnotonly

6、inplants，fungi，cyanobacteriaandalgaebutalsoABAexistsandfunctionsinawiderangeofloweranimals，suchassponges，aswellasmammalsincludingvarioushumantissuesandcells．ABAcanalsobeproducedandreleasedfromtheseanimalcellsandasaregulatoronstressresponse，tissueregeneration，inflammati

7、onandglucosemetabolism．ThesignalpathwayinanimalisremarkablysimilartothatinplantswhichABAfirstbindstotheABA—bindingproteinlocatedintheplasmamembraneandactivatesintracellularADP—ribosecyclasewhichwouldpromotetheproductionofthecyclicADP．riboseresultinginincreasesofintrace

8、llularCa2+concentrationsandthentriggersmanyothercorrelativesignalpathways．TheseresultsimplythatABAmayactasanendogenou