急性恐惧应激对大鼠激素水平、空间学习记忆行为的影响论文

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1、急性恐惧应激对大鼠激素水平、空间学习记忆行为的影响论文【关键词】恐惧应激;激素类;学习;记忆;大鼠Effectsofacutefearstressonhormonelevels,abilitiesofspatiallearningandmemoryofrats【Abstract】AIM:Tostudytheeffectsofacutefearstressonthehormonelevels,andtheabilitiesofspatiallearningandmemoryofrats.METHODS:ThirtytaleSDrat

2、slydividedintocontrolgroup(n=16)andstressgroup(n=16).Ratsofstressgroupreceived30minacutestressincludingemoryperformanceeasuredbyMorrisaze.Thehormonelevelsinplasmaandbraininedbyspectrophotofluorometryandradioimmunoassaykit.RESULTS:Inazetask,thetimetakenforfearstressedr

3、atstofindtheplatform(latency)forspatialbiaslocationicandcerebralnoradrenaline,corticosteroid,5hydroxytryptaminelevels,andloedulinlevelinparisonalitiesoflearningandmemoryofrats,andthealterationofhormonelevelsinthisprocessmaybeasignificantmechanismunderlyingtheeffect.【K

4、eyones;learning;memory;rats【摘要】目的:观察急性应激对大鼠激素水平、空间学习记忆行为的影响,探讨恐惧应激对机体学习记忆能力的影响及其机制.方法:成年雄性SpragueDa×30cm×20cm)中,由电刺激发生装置(由第四军医大学物理学教研室提供)输出为48V,持续1s,间隔5s,电流经笼底金属栅刺激大鼠足底,刺激时间为30min.同时由DF1681型噪声信号发生器经扬声器输出95dB,20Hz20kHz的白噪声作用于大鼠.对照组不受应激原影响.大鼠空间学习记忆能力的观察,采用morris水迷宫法.第1~

5、4日为空间定向条件反射训练(spatialbias).4次/d,每次2min,记录大鼠从不同象限入水至发现并爬上平台的时间为训练潜伏期,每3次的均值作为1个观察单位,比较所得的各观察单位训练潜伏期变化以分析动物获取空间信息的能力;第5日应激组大鼠首先接受30min的足电击+噪声刺激,然后重复测试潜伏期(latencyperiod),并进行空间觅向能力测试(probetrial),即先将平台移去,再将动物放入水中2min,记录它穿过原平台位置的次数(以平台2倍直径计算),以判断动物记忆储存及提取再现能力.应激后,8只大鼠分别于0mi

6、n和30min两个时间点断头处死大鼠,取血,并迅速在冰上分离全脑组织,分别检测血浆中和脑组织中的激素水平:去甲肾上腺素(NE)和5羟色胺(5HT)水平检测采用荧光分光光度法[1];样品测定:脑组织加10倍脑体积量冷酸性正丁醇在玻璃试管中,置于冰水浴中,内切式匀浆机匀浆,匀浆液用2000r/min离心5min,取上清液2.5mL置于内含0.1mol/LHCL1.0mL和正庚烷5.0mL的具塞离心管中,充分振荡5min,2500r/min离心5min,从下面水相中分别取0.5mL和0.4mL.前者用于测定NA,后者用于测定5HT.NA

7、测定:于0.5mL上述水相提取液中,加入1/15mol/LpH7.2的磷酸盐缓冲液1.5mL和EDTA试剂0.4mL,混合;加入碱性亚硫酸钠溶液0.4mL混合,3min后,加入5mol/L冰醋酸0.4mL,混合,具塞避光置于80℃水浴5min,取出迅速冷却后立即在380/490nm波长进行NA荧光强度测定.5HT测定:取水相提取液0.4mL,加2.5g/L半光氨酸0.1mL.混合后加0.01g/LOPT和8molHCL混合液3mL,混合后置于沸水浴中10min,取出后立即冷却,用360/480nm波长进行5HT荧光强度测定.同时作

8、空白管测定,将各样品剩余之水相提取液混合,取其中0.4mL,加8mol/LHCL3.0mL置于沸水浴中10min,加1g/LOPT和8molHCL混合液30μL和2.5g/L半光氨酸0.1mL,然后在360/480nm波长下测定荧光强度.肾上腺皮质

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