急性恐惧应激对大鼠激素水平、空间学习记忆行为的影响

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1、急性恐惧应激对大鼠激素水平、空间学习记忆行为的影响【关键词】恐惧应激；激素类；学习；记忆；大鼠　　Effectsofacutefearstressonhormonelevels,abilitiesofspatiallearningandmemoryofrats　　【Abstract】AIM:Tostudytheeffectsofacutefearstressonthehormonelevels,andtheabilitiesofspatiallearningandmemoryofrats.METHODS:ThirtytaleSDratslydividedintocontrolgr

2、oup(n=16)andstressgroup(n=16).RatsofstressgrouprecEIved30minacutestressincludingemoryperformanceeasuredbyMorrisaze.Thehormonelevelsinplasmaandbraininedbyspectrophotofluorometryandradioimmunoassaykit.RESULTS:Inazetask,thetimetakenforfearstressedratstofindtheplatform(latency)forspatialbiaslocat

3、ionicandcerebralnoradrenaline,corticosteroid,5hydroxytryptaminelevels,andloedulinlevelinparisonalitiesoflearningandmemoryofrats,andthealterationofhormonelevelsinthisprocessmaybeasignificantmechanismunderlyingtheeffect.　　【Keyones;learning;memory;rats　　【摘要】目的：观察急性应激对大鼠激素水平、空间学习记忆行为的影响，探讨恐惧应激对机体

4、学习记忆能力的影响及其机制.方法：成年雄性SpragueDa×30cm×20cm）中，由电刺激发生装置（由第四军医大学物理学教研室提供）输出为48V，持续1s，间隔5s，电流经笼底金属栅刺激大鼠足底，刺激时间为30min.同时由DF1681型噪声信号发生器经扬声器输出95dB，20Hz20kHz的白噪声作用于大鼠.对照组不受应激原影响.大鼠空间学习记忆能力的观察，采用morris水迷宫法.第1～4日为空间定向条件反射训练（spatialbias）.4次/d，每次2min，记录大鼠从不同象限入水至发现并爬上平台的时间为训练潜伏期，每3次的均值作为1个观察单位，比较所得的各观察单位训

5、练潜伏期变化以分析动物获取空间信息的能力；第5日应激组大鼠首先接受30min的足电击+噪声刺激，然后重复测试潜伏期（latencyperiod），并进行空间觅向能力测试（probetrial），即先将平台移去，再将动物放入水中2min，记录它穿过原平台位置的次数（以平台2倍直径计算），以判断动物记忆储存及提取再现能力.应激后，8只大鼠分别于0min和30min两个时间点断头处死大鼠，取血，并迅速在冰上分离全脑组织，分别检测血浆中和脑组织中的激素水平：去甲肾上腺素（NE）和5羟色胺（5HT）水平检测采用荧光分光光度法［1］；样品测定：脑组织加10倍脑体积量冷酸性正丁醇在玻璃试管中，

6、置于冰水浴中，内切式匀浆机匀浆，匀浆液用2000r/min离心5min，取上清液2.5mL置于内含0.1mol/LHCL1.0mL和正庚烷5.0mL的具塞离心管中，充分振荡5min，2500r/min离心5min，从下面水相中分别取0.5mL和0.4mL.前者用于测定NA，后者用于测定5HT.NA测定：于0.5mL上述水相提取液中，加入1/15mol/LpH7.2的磷酸盐缓冲液1.5mL和EDTA试剂0.4mL，混合；加入碱性亚硫酸钠溶液0.4mL混合，3min后，加入5mol/L冰醋酸0.4mL，混合，具塞避光置于80℃水浴5min，取出迅速冷却后立即在380/490nm波长进

7、行NA荧光强度测定.5HT测定：取水相提取液0.4mL，加2.5g/L半光氨酸0.1mL.混合后加0.01g/LOPT和8molHCL混合液3mL，混合后置于沸水浴中10min，取出后立即冷却，用360/480nm波长进行5HT荧光强度测定.同时作空白管测定，将各样品剩余之水相提取液混合，取其中0.4mL，加8mol/LHCL3.0mL置于沸水浴中10min，加1g/LOPT和8molHCL混合液30μL和2.5g/L半光氨酸0.1mL，然后在360/480nm波长下测定荧光强度