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1、血氨升高对大鼠空间学习记忆能力的影响 1材料和方法 1.1主要材料氯化铵由无锡市民丰试剂厂提供(批号：20070901)。 1.2动物分组与喂养SD大鼠40只，由温州医学院动物中心提供(许可证号：SCXK浙2005-0019)，体重200～240g，随机分为A组(正常对照组20只)和B组(高血氨模型组20只)。所有大鼠均在室温恒定(20～25℃)及灯光昼夜节律控制(8：00—20：00)下清洁级喂养，自由进食、进水。 1.3实验方法A组：每周前5d每天1次腹腔内注射生理盐水0.5mL/1
2、00g，连续4周。B组：将氯化铵溶解于生理盐水使其最终浓度为5%，按0.5mL/100g的剂量腹腔内注射，每周前5d每天1次，连续4周建立慢性高血氨模型[3]。 1.4Morris水迷宫实验Morris水迷宫设置参见文献[4]。实验前各组大鼠称量体重。实验共进行5d。第1天让大鼠自由游泳2min，从第2天起，每天分上午、下午两段，每段训练4次，大鼠面向池壁按顺序从4个入水点放入池中，观察大鼠寻找并爬上平台情况。每次大鼠到达平台后，在平台上休息30s。第5天最后一次训练，记录大鼠寻找并爬上平台的
3、路线图、所需时间。如果在120s内大鼠仍未能找到平台，则将其引导到平台，时间记为120s。各统计数据由上海吉量软件自动分析生成。学习记忆成绩用两个参数反映：平均逃避潜伏期(即大鼠找到平台所需的时间)和游泳总距离(即大鼠找到平台游泳的轨迹，由迷宫上方的摄像头记录，总距离由上海吉量软件自动分析生成)[4]。 1.5血游离氨的测定行为学实验后，大鼠经用10%水合氯醛(4mL/kg)腹腔麻醉，经下腔静脉采血。标本肝素抗凝，放入EP管中，低温3000r/min离心5min。取血浆经强生VITROS350
4、生化分析仪测定血氨含量。 1.6统计学处理方法两组比较采用t检验。 2结果 2.1大体观察氨中毒模型组大鼠放入Morris水迷宫内，绝大多数游泳姿势正常。 2.2两组大鼠血氨水平的比较B组大鼠血氨水平为(78.6±11.92)μmol/L，与A组[(26.2±7.78)μmol/L]比较，明显升高(P<0.05)。 2.3两组大鼠空间学习记忆能力的比较与A组比较，B组大鼠平均逃避潜伏期延长且游泳总距离增加(均P<0.05)，见表1。 3讨论 脑细胞对氨极敏感。血氨过高一
5、方面抑制丙酮酸脱氢酶活性，从而影响乙酰辅酶A的生成，干扰脑中三羧酸循环;另一方面氨在大脑的去毒过程中需消耗大量的α-酮戊二酸和谷氨酸，而α-酮戊二酸是三羧酸循环中的重要中间产物，缺少则使大脑细胞的能量供应不足，以致不能维持正常功能;谷氨酸是大脑的重要兴奋性神经递质，缺少则大脑抑制增加。新近研究认为氨的毒性还体现在它直接作用于神经膜，可引起突触后抑制[5]。但目前有关氨对空间学习记忆功能影响方面的研究鲜见报道。 本实验通过多次经腹腔注射小剂量氯化铵建立慢性氨中毒模型。游离血氨测定结果显示，氨中毒
6、模型组大鼠血氨水平明显升高。同时发现，大鼠基本活动能力未受到明显影响，在Morris水迷宫内，绝大多数大鼠游泳姿势正常，可以进行行为学检测。 综上所述，血氨升高可导致大鼠学习记忆功能下降，但其具体机制尚待进一步研究。【参考文献】 [1]王宇明.肝性脑病的定义、命名和诊断[J].中华肝脏病杂 志,2004,12(5):305-306. [2]HindfeltB,PlumF,DuffyTE.Effectofacuteammonia intoxicationoncerebralmetabol
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