布地奈德对哮喘小鼠气道上皮occludin和e-cadherin表达的影响

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1、目录1布地奈德对哮喘小鼠气道上皮occludin和E．cadhefin表达的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯011．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯011．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯031．3前言⋯OOO⋯⋯⋯⋯Ooo⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯Ooo⋯071．4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯091．5结果⋯⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201．6讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯281．7结

2、论⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351．8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯361．9英汉缩略词对照表⋯⋯⋯OOO⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯412致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯423文献综述：气道上皮屏障在哮喘防御机制中的研究进展⋯⋯⋯43泸州医学院硕士学位论文布地奈德对哮喘小鼠气道上皮occludin和E．cadherin表达的影响摘要目的：观察哮喘小鼠气道上皮闭锁蛋白(occludin)和E．钙粘蛋白(E．cadherin)的表达和布地奈德(BUD)对其表达

3、的影响，探讨occludin和E．cadherin在哮喘发病中的作用及糖皮质激素治疗哮喘的机制。方法：将24只SPF级雌性BALB／c小鼠随机分成哮喘组、布地奈德治疗组(BUD组)及对照组，每组8只。哮喘组：O、7、14d腹腔注射新鲜配制的卵蛋白(OVA)+氢氧化铝的生理盐水(NS)混悬溶液0．2ml[含OVA20lxg，氢氧化铝2mg】致敏，第21d起给予1％OVA雾化吸入激发30min，1次／d，连续14d，每次激发前1h雾化吸入NS2ml。BUD组：致敏及激发同哮喘组，但每次激发前1h雾化吸入布地奈德混悬液1mg(2m1)。对照组

4、：用相同的方法以NS代替OVA进行致敏和激发。小鼠末次激发24h后处死，苏木精一伊红(HE)染色观察支气管肺组织病理学的改变；电镜观察气道上皮的超微结构；过碘酸．雪夫氏染色(PAS)法观察气道黏膜上皮层杯状细胞增生和黏液分泌情况；支气管肺泡灌洗液(BALF)行嗜酸性粒细胞计数；免疫组织化学染色法观察气道上皮occludin和E．cadherin的表达；实时荧光定量PCR(Real．timePCR)检测occludinmRNA的表达。结果：(1)HE染色：哮喘组小鼠气道上皮细胞坏死脱落，支气管黏膜层大量炎症细胞浸润，黏液腺增生，基底膜增厚

5、，气道管腔狭窄，部分管腔内可见黏液栓；BUD组上述病理改变较哮喘组减轻；对照组未见上述病理改变。3组小鼠的Underwood肺组织病理学评分分别为哮喘组(4．1±O．675)、BUD组(2．3+0．736)矛1]对照组(O．5±O．506)，三组比较差异具有统计学意义(P<0．05)，BUD组评分比哮喘组低(尸

6、喘组有所减轻。对照组未见上述改变。(3)PAS染色：与对照组(0．250+0．463)比较，哮喘组气道上皮PAS染色阳性的杯状细胞数(3．375+0．744)明显增多，差异有统计学意义(P<0．01)；与哮喘组比较，BUD组杯状细胞数(1．625+0．518)增生减少，但仍高于对照组，差异有统计学意义(P<0．01)。(4)BALF中嗜酸性粒细胞(EOS)计数：与对照组(O．750+0．707)比较，哮喘组EOS数量(20．875+1．808)明显增加，差异具有统计学意义(P<0．01)；与哮喘组比较，BUD组EOS数量(10．625+

7、1．302)减少，但仍高于对照组，差异有统计学意义(P<0．01)。(5)免疫组织化学染色：对照组小鼠occludin、E．cadherin主要在气道上皮细胞表面和细胞与细胞间的包膜上呈连续的强阳性表达，而BUD组表达强度减弱，为不连续表达，但仍比哮喘组表达明显。哮喘组occludin的平均光密度值(OD值)(O．126+0．032)日fJ显低于对照组(O．652+0．313)及BUD组(O．337+O．028)，差异具有统计学意义(P

8、erin的OD值(O．173+0．043)低于对照组(O．656+0．068)及BUD组(0．288+0．049)，差异具有统计学意义(P<0．01)，BUD组的OD值仍较对照组低，差异具有统计学意义(P<