eswt联合epcs移植促进缺血皮瓣成活作用与机制

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时间:2019-03-07

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1、上海交通大学博士学位论文ESWT联合EPCs移植促进缺血皮瓣成活的作用与机制姓名:燕晓宇申请学位级别:博士专业:外科学(骨科)指导教师:曾炳芳20080401上海交通大学博士学位论文ESWT联合EPCs移植促进缺血皮瓣成活的作用与机制中文摘要目的:探讨低能量体外震波治疗(extracorporealshockwavetherapy,ESWT)对内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)的生物学功能和对皮瓣组织内多种血管活性因子表达的影响,并将低能量体外震波(extracorporealshockwave,ESW)干预与EPCs移植结合应用,

2、探讨其改善缺血皮瓣的血流、促进其血管新生及增加皮瓣存活的效果,从组织学、细胞学、分子生物学和基因等多个层次探讨其机制,从而为促进缺血皮瓣的存活、预防其坏死找到有效的方法,为改善缺血组织的血管新生和提高EPCs移植移植效果寻找新的思路。方法:用低能量ESW干预原代的EPCs,比较观察细胞的活力、增殖、功能和生长因子表达的变化情况;建立大鼠背部超长宽比例的缺血随意皮瓣模型,分别用同样的低能量ESW处理、EPCs移植和EPCs移植后立即加低能量ESW干预的方法对皮瓣进行治疗,在皮瓣手术后,比较观测皮瓣内的血流量、皮瓣的存活,皮瓣内血管的分布和密度,以及皮瓣内血流灌注范围,检测皮瓣

3、组织内一氧化氮(No)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)的表达情况,并观察移植的EPCs在移植入皮瓣后的转归情况。结果:体外实验显示,用0.09mJ/mm2、1000脉冲的低能量ESW干预上海交通大学博上学位论文中文摘要原代培养的EPCs,不降低细胞的活力,并可增加其增殖能力,增加其体外成管等生物学功能,并促进细胞产生NO,表达VEGF等。体内实验中,分别采用EPCs移植、0.09mJ/mm21000脉冲的低能量ESWT及两者联合应用的方法,在皮瓣手术后立即治疗,在术后10天,皮瓣的成活率分别是61.8%、7

4、8.0%、90.1%,而对照组为49.O%。在低能量ESWT组及两者联合应用组,与对照组和单独EPCs移植组相比,术后皮瓣内的血流量改善比较明显,术后早期原有的血管发生了比较明显的扩张,在中后期新血管形成比较明显,微血管密度增加比较明显,皮瓣组织内NO、eNOS、VEGF和FGF一2的含量及其mRNA的表达水平提高比较显著;在联合治疗组,移植的EPCs在皮瓣内存活的数量多于单独EPCs组。单独EPCs移植组,上述指标较对照组均有增加,但明显低于低能量ESWT组及两者联合应用组。上述的差异均有统计学意义(p<0.05)。结论:本实验的结果证实:(1)低能量ESW可以作为一种有

5、效的刺激因素,促进EPCs表达VEGF和NO/eNoS,促其增殖分化,增强其粘附和成管等生物学功能。(2)低能量ESW作用于皮瓣,可以促使皮瓣组织表达VEGF、FGF-2、NO/eNOS等血管活性因子,促进皮瓣内血管发生扩张和新血管形成,从而增加术后皮瓣的血流量,促进其成活。(3)单独EPCs移植后,可以在一定程度上改善皮瓣的存活,但其效果有限,低于低能量ESW干预的方法。(4)EPCs移植后立即用低能量ESW干预,可以通过增加皮瓣组织中多种血管活性因子的释放,增强EPCs的增殖分化及其生物学功能,从而更加有效地促进新血管形成,加快缺血皮瓣的血供重建,扩大其存活面积。Ⅱ上海

6、交通大学博上学位论文本实验为促进缺血皮瓣的存活、预防术后坏死找到一种新的有效方法,为改善缺血组织的血管新生和提高EPCs移植移植效果找到了新的思路,也为EPCs移植及低能量ESWT在缺血性疾病的应用提供了实验依据。关键词:体外震波(ESW),皮瓣,缺血,内皮祖细胞(EPCs),血管新生,再血管化,生长因子III上海交通大学博士学位论文ABSTRACTTHEEFFECTANDMECHANISMoFCOMBINEDTREATMENToFESWTANDEPCsTRANSPLANTATIONINAUGMENTINGTHESURVIVALOFISCHEMICFLAP.ABSTRACT

7、Objective:Thepurposesoftheexperimentincludedin:(1)toinvestigatetheimpactoflow—energyextracorporealshockwavetherapy(ESWT)ontheviabilityandproangiogenicfunctionofendothelialprogenitorcells(EPCs)andontheexpressionofangio—activefactorssuchasnitricoxide(N0),vascula

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