内毒素对nrk52e细胞生长及细胞间缝隙连接功能的影响

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1、第31卷第2期中山大学学报(医学科学版)V01.3lNo.22010年3月JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES)Mar.2010内毒素对NRK52E细胞生长及细胞问缝隙连接功能的影响位静,甘小亮,罗晨芳,李晓芸,陈景辉,黑子清(中山大学附属第三医院麻醉科,广东广州510630)摘要:【目的】研究不同浓度内毒素(LPS)对NRK52E细胞生长和细胞问缝隙连接功能的影响。【方法】体外培养NRK52E细胞,随机分为对照组及LPS处理组,LPS处理组分别用5个不同浓度的L

2、PS(10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL)作用24h。采用四甲基偶氮唑盐法检测NRK52E细胞的生长;细胞荧光免疫示踪法测定NRK52E细胞间缝隙连接传递的功能;WesternBlotting测定对照组、LPS10ng/mL组和LPS100ng/mL组Cx43蛋白的表达。【结果】①与对照组和LPS10ng/mL组相比.LPS50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL及l000ng/mL组细胞生长明显降低(P<0.01)。②与对照组相比,LPS100ng/mL

3、、500ng/mL及1000ng/mL组细胞间缝隙连接功能明显降低(P<0.01)。③内毒素浓度与NRK52E细胞生长和细胞间缝隙连接传递数目呈负相关r=一0.941。一0.872,P<0.01)。④与对照组比较,LPS10ng/mL组和LPS100ng/mL组的Cx43蛋白表达明显降低(P

4、)02.0249—04EfectsofEndotoxinonGrowthActivityandGapJunctionofNRK52ECellsWEIJing,GANXiao—liang,LUOChen—fang,LIXiao·yun,CHENJing—hui,HEIZi—qing(DepartmentofAnesthesiology,TheThirdAffiliatedHospital,SunYat—senUniversity,Guangzhou510630,China)Abstract:【Objective】Thi

5、sstudywasdesignedtoobservetheeffectsofendotoxin(LPS)onthegrowthactivityandgapjunction(GJ)ofNRK52Ecells.【Methods】TheNRK52EcellsweredividedintocontrolgroupandLPSgroups,andtheNRK52EcellsinLPSgroupsweretreatedwithLPS10ng/mL,50ng/mL,100ng/mL,500ng/mL,andl000ng/mLfor

6、24hrespectively.TheNRK52EcellsgrowthactivitywasmeasuredthroughM1Trmethod,andthefunctionofgapjunctionofNRK52Ecellswasmeasuredthroughthemethodoffluoroimmunoassay.Theproteinexpressionofconnexin43(Cx43)incontrolgroup,LPS10ng/mLgroup,andLPS100ng/mLgroupwerealsodeter

7、minedbyWesternblotting.【Results】①ComparedwithcontrolgroupandLPS10ng/mLgroup,TheNRK52EcellsgrowthactivitydecreasedsignificantlyinLPS50ng/mL,100ng/mL,500ng/mL,and1000ng/mLgroups(P<0.01).②Comparedwithcontrolgroup,thefunctionofGJdecreasedsignificantlyinLPS100ng/mL,

8、500ng/mL,and1000ng/mLgroups(P<0.O1).⑧TherewerenegativecorrelationsamongtheconcentrationofLPSandNRK52EcellsgrowthactivityandGJfunctionrespectively(r=-0.941,一0.872,P<0.01).④Co

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